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loading buffer
loading buffer 的中文名字叫 上样缓冲液 ,6*的缓冲液中可以显示两条带，前面的蓝
色的条带是 溴酚蓝 ，代表的片段大小是 300bp ，后面的有点绿色的条带是 二甲苯青 ，
代表的片段大小在 4000bp 左右。 loading buffer 的功能主要有两个。 第一，里边的
指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的作用，显示电泳的进程，以便我们适时终止电泳；
第二，里边的成分 甘油可以加大样品密度 ，使样品密度大于 TAE ，从而沉降到点样孔中，
防止样品飘出点样孔 。另外，有的 Buffer 是加有 SDS 的，一般都会写明。 SDS 主要是
促使聚合酶变性，因为没有除尽的聚合酶会结合在 DNA 双链上影响它的迁移速率。细
胞裂解后的裂解液， 加 loading 100 ℃加热， 也是为了中止酶促反应， 防止提取的蛋白质
降解 。 6 ×loading buffer 一 般 配置： 6 ×Loading buffer: 30mM EDTA
36%(v/v) Glycerol （甘油） 0.05%(w/v) Xylene Cyanol FF （二甲苯青 FF)
0.05%(w/v) Bromophenol BLUE ( 溴酚蓝 ) 5 ×SDS-PA GE Loading Buffer 配制方法
组份浓度： 250mM Tris-HCl （pH6.8 ） 10 ％ （W/V ） SDS 0.5 ％ （W/V ） BPB
50 ％ （V/V ） 甘油 5 ％ （W/V ） β-巯基乙醇 配制量： 5mL 配制方法： 1.
量取下列试剂，置于 10mL 塑料离心管中。 1M Tris-HCl 1.25mL SDS 0.5g
BPB 25mg 甘油 2.5mL 2. 加入去离子水溶解后定容至 5mL 。 3. 小份
（500 μl/份）分装后， 于室温保存。 4. 使用前将 25 μl 的2-ME 加到每小份中。 5.
加入 2-ME 的 Loading Buffer 可在室温下保存一个月左右
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