蛋白质工程作业答案.pdfVIP

第三章 蛋白质工程 习题 1、名词解释：蛋白质工程： 是基于对蛋白质结构和功能关系的认识，进行分子设计，通过 基因工程途径定向地改造蛋白质或创造合乎人类需要的新的突变蛋白质的理论及实践， 是基 因工程基础上的延伸，是第二代基因工程。 蛋白质分子设计： 是为有目的的蛋白质工程改造提供设计方案， 即在知道了需要改造的蛋白 质的性能及其相应的结构基础之后，通过理论的方法，提出蛋白质改造的设计方案。 嵌合抗体： 用 DNA重组技术将鼠源单抗的可变区 (V 区) 基因与人免疫球蛋白 (Ig) 的恒定区 (C 区 ) 基因相连接 , 构建成嵌合基因 , 导入宿主细胞进行表达 , 制成嵌合抗体。目前国内外已制 备了数十种嵌合抗体。 PDB:蛋白质结构数据库 。 2、请列表总结基因工程和蛋白质工程的相同点、不同之处（从结果、实质、流程等方面） 及其联系。 基因工程 蛋白质工程 相同点 操作环境 —— 生物体外；操作对象 —— 基因；操作水平 —— 分子 结果 天然存在的蛋白 自然不存在的蛋白 实质 基因重组 基因修饰或基因合成 流程 中心法则 中心法则逆推 联系 蛋白质工程是在基因工程基础上的延伸，是第二代基因工程 3、蛋白质工程的基本目标、基本途径是什么？ 答：基本目标：对现有蛋白质进行改造 , 或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的 需要。 基本途径：基因修饰或基因合成：借助计算机辅助设计、基因定点诱变和重组 DNA技术 4、目前有哪些蛋白质工程分子改造的常用方法？ 答 ： ⒈基因定点突变技术（小改） ：即通过在 DNA水平上进行碱基的取代、插入或缺失，达 到改变基因，从而改变编码的蛋白质的结构的技术，包括核苷酸引物诱变，盒式诱变， PCR 诱变，随机诱变。⒉基因剪切和融合（中改） ：原理：将编码某蛋白的部分基因移植到另种 蛋白基因上，经克隆、表达，产生新的融合蛋白。可达到使蛋白易于表达、纯化、细胞定位 等，或使蛋白性质改变。⒊基因全合成（大改） ：合成 DNA，然后表达出相应蛋白。可以全 部由人工控制，便于设计和改造，还适用于同时实现多处突变。 5、蛋白质工程中增加蛋白质稳定性的基本途径有哪些？ 答：蛋白质结构与功能研究表明， 上述稳定蛋白质空间构象的因素是由蛋白质一级结构中某 一个或某一段氨基酸序列决定的， 人工改变或修饰这些氨基酸残基， 有可能增加蛋白质的稳 定性，又不影响其生物学活性。 设计目标 解决办法 热稳定性 引入二硫桥 增加内氢键数目 改善内疏水堆积 增加表面盐桥 对氧化的稳定性 把 Cys 转换为 Ala 或 Ser 把 Met 转换为 Gln 、Val 、Ile 或 Leu 把 Trp 转换为 Phe 或 Tyr 对重金属的稳定性 把 Cys 转换为 Ala 或 Ser