【总结】高效液相色谱法精华总结.docxVIP

精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 |精. |品. |可. |编. |辑. |学. |习. |资. |料. * | * | * | * | |欢. |迎. |下. |载. 高效液相色谱法的进展 在全部色谱技术中，液相色谱法（ liquid chromatography ， LC ）是最早（ 1903 年）创造的，但其初期进展比较慢，在液相色谱普及之前，纸色谱法、气相色谱法和薄层色谱法 是色谱分析法的主流；到了 20 世纪 60 岁月后期，将已经进展得比较成熟的气相色谱的理 论与技术应用到液相色谱上来，使液相色谱得到了快速的进展；特殊是填料制备技术、检测技术和高压输液泵性能的不断改进，使液相色谱分析实现了高效化和高速化；具有这些 优良性能的液相色谱仪于 1969 年商品化；从今，这种分别效率高、分析速度快的液相色谱 就被称为高效液相色谱法（ high performance liquid chromatography ， HPLC ），也称高压液相色谱法或高速液相色谱法； 气相色谱只适合分析较易挥发、且化学性质稳固的有机化合物，而 HPLC 就适合于分析那些用气相色谱难以分析的物质，如挥发性差、极性强、具有生物活性、热稳固性差的 物质；现在， HPLC 的应用范畴已经远远超过气相色谱，位居色谱法之首； 高效液相色谱的类型 广义地讲，固定相为平面状的纸色谱法和薄层色谱法也是以液体为流淌相，也应归于液相色谱法；不过通常所说的液相色谱法仅指所用固定相为柱型的柱液相色谱法； 通常将液相色谱法按分别机理分成吸附色谱法、安排色谱法、离子色谱法和凝胶色谱 法四大类；其实，有些液相色谱方法并不能简洁地归于这四类；表 8-1 列举了一些液相色谱方法；按分别机理，有的相同或部分重叠；但这些方法或是在应用对象上有特殊之处， 或是在分别过程上有所不同，通常被给予了比较固定的名称； 液相色谱仪流程图 现在的液相色谱仪一般都做成一个个单元组件，然后依据分析要求将各所需单元组件组合起来；最基本的组件是高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器和数据系统（记录仪、积分仪或色谱工作站）；此外，仍可依据需要配置流淌相在线脱气装置、梯度洗脱装置、 自动进样系统、柱后反应系统和全自动掌握系统等；图 8-1 是具有基本配置的液相色谱仪的流程图； 液相色谱仪的工作过程：输液泵将流淌相以稳固的流速（或压力）输送至分析体系， 在色谱柱之前通过进样器将样品导入 ,流淌相将样品带入色谱柱 ,在色谱柱中各组分因在固定相中的安排系数或吸附力大小的不同而被分别，并依次随流淌相流至检测器，检测到的信 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 号送至数据系统记录、处理或储存； 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 |精. |品. |可. |编. |辑. |学. |习. |资. |料. * | * | * | * | |欢. |迎. |下. |载. 输液泵 高压输液泵是液相色谱仪的关键部件，其作用是将流淌相以稳固的流速或压力输送到色谱系统；对于带在线脱气装置的色谱仪，流淌相先经过脱气装置再输送到色谱柱；输液泵的稳固性直接关系到分析结果的重复性和精确性； 对输液泵的基本要求 流量精确可调；对于一般的分析工作而言，流淌相的流速在 0.5-2mL/min ，输液泵的最大流量一般为 5-10mL/min ；输液泵的流量掌握精度通常要求小于± 0.5%；输液泵必需能精确地调剂流淌相流量，这可以通过电子线路调剂电机转速或冲程长短来实现；流量的测 定通常采纳热脉冲流量计； 耐高压；高效液相色谱柱是将很细颗粒（ 3-10 粒径）的填料，在高压下填充到柱管中的，为了保证流淌相以足够大的流速通过色谱柱，需要足够高的柱前压；通常要求泵的输 出压力达到 30-60MPa 的高压； 液流稳固；输液泵输出的液流应无脉动，或配套脉冲抑制器； 泵的死体积小；为了快速更换溶剂和适于梯度洗脱，泵的死体积通常要求小于 0.5mL ；泵的结构材料应耐化学腐蚀； 输液泵 输液泵按输出液恒定的因素分恒压泵和恒流泵；对液相色谱分析来说，输液泵的流量稳固性更为重要，这是由于流速的变化会引起溶质的保留值的变化，而保留值是色谱定性的主要依据之一；因此，恒流泵的应用更广泛； 输液泵按工作方式分为气动泵和机械泵两大类；机械泵中又有螺旋传动注射泵、单活塞往复泵、双活塞往复泵和往复式隔膜泵；几种输液泵的基本性能总结于表 8-2； 活塞型往复泵 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 精品word学习资料可编辑 名师归纳总结——欢迎下载 |精. |品. |可. |编. |辑. |学. |习. |资. |料. * | * | *