水产品兽药残留检测技术概述.pptx

廖 建 萌;主要内容;水产品兽药残留分析概述;水产品兽药残留分析概述;水产品兽药残留分析概述;水产品兽药残留分析概述;兽药残留检测概述;1.文献检索 文献检索仅能显示最适宜的分析方法可能是什么，提供样品处理，分离和检测方面粗略信息，进行方法的比较和借鉴，调整具体的实验条件，改进和建立符合要求的新方法。如针对新对象或采用新技术，可以从较早的化学合成文献得到待测物的物理性质或分离方面的原始资料，或从具有相近结构或官能团化合物的方法方法中获得某些信息和提???。有现成标准方法的采用现成标准方法（验证）。 2.建立测定方法 建立测定方法和线性范围，为后续的各种工作提供分析手段，最后根据干扰和使用情况逐步确立测定条件和建立标准曲线。如兽残及代谢物属中等极性或较高极性化合物，不能直接进行GC分析，HPLC常用的检测器有紫外（UVD），荧光（FLD，共轭双烯）,电化学（EehlD）。MS为非常规检测器。;3.建立样品处理方法 提取，净化，衍生 4.标准曲线 LC-MS/MS要求设4个点，相关系数大于0.995，有外标（基质匹配法）和内标，标准加入法，基质匹配法。 5.稳定性试验 一般包括标准溶液（溶剂）和样品中贮存条件下的稳定性试验，如室温，冷冻，反复冷冻-解冻条件下的稳定性。 6.方法评价 准确度，精密度，灵敏度等。 ; 样品处理方法涉及的因素很多，操作复杂，方法灵活，直接影响各项分析指标、成本和效率，一般占70%的分析工作量。; 常用的提取溶剂有乙腈，甲醇，丙酮，这些溶剂与水，稀酸，稀碱的混合溶剂如乙腈-甲醇，氯仿-甲醇，乙腈-水，或酸化，碱化等。乙酸乙酯，氯仿，二氯甲烷，乙醚和叔丁基甲醚。叔丁基甲醚可代替卤代溶剂。 ;乙腈，甲醇，丙酮与样品容易结合，溶剂化作用和渗透能力强，粘度小，提取速度快，能使结合态的药物释放，提取的同时脱蛋白脱脂，PH值可调，待测物分布均匀。但提取的杂质较多，进一步萃取乳化严重，效果相似，甲醇提取液的杂质最高。“万能溶剂”DMSO沸点高极少用。 在酯溶性的残留物中，采用非水溶性极性溶剂，乙酸乙酯，氯仿，二氯甲烷，乙醚。 加无水硫酸钠，盐析提高回收率。干样（含水小10%）加水增强提取。 ; 均浆提取法；震荡法；索氏提取法（考虑热稳定性，适合水分少如饲料样品，水产品组织要和海砂或无水硫酸钠一起研磨成干粉）；超声波提取（SAE，空化作用，增加溶解，时间不能长，发热）；超临界流体萃取（SFE），强化溶剂萃取（ASE）和微波辅助萃取（MAE）; 超临界流体密度与液体相似，但是溶质在其中的扩散系数比液体中大得多。 极性低的碳氢化合物，醚，酯，环氧化合物，可以在低压力下提取（7-10MPa）进行萃取，羟基，羧基难萃取，一个羧基和两个羟基的化合物和三个酚羟基的苯环衍生物可以被萃取；40 MPa以下，糖和氨基酸都不能被萃取；分级极性差异和挥发性差异。; 超临界流体萃取仪—流体源，加压装置，控温装置，萃取容器，节流装置，收集装置。CO2作为流体操作温度低，利于热不稳定的化合物，组分中不含氧，防止氧化。;液-液萃取LLE LLE利用待测组分与样品杂质在互不相溶的两相中溶解性差异进行净化。设计的基础为：极性组分与非极性组分；极性物质再分成酸性，中性，碱性物质。正己烷（石油醚）-乙腈；正己烷-甲醇；正己烷-丙酮；异辛烷-80%丙酮；氯仿-水；乙酸乙酯-水。 影响因素：溶剂，PH值（磺胺，喹诺酮，苯并米唑类，苯乙胺类等）;液-液萃取操作方法 分液漏斗震荡，漩涡萃取，逆流萃取，特殊容器萃取。 从水相中提取药物时溶剂中常带如少量的水分，可干扰固相萃取，延长浓缩时间和增加杂质，加无水硫酸钠脱水。高极性的药物在净化中发生吸附，硅烷化玻璃器皿（1%三甲基氯硅烷的甲苯溶液淌一次，100℃下干燥30min）；加异丙醇或二乙胺也能降低吸附。;固相萃取（SPE） 采用固相萃取小柱作为分离媒介，小柱中添加了不同填料的固定相，以键合硅胶为基质的C18、NH2、COOH、PSA、SAX等，是硅胶的表面活性大为降低，最大程度的降低了极性化合物的不可吸附和拖尾，使样品回收率和重现性得到保障；以高分子聚合物为基质的如PEP、HXN、PAX、PCX等，具有高纯度、高比表面的特点；以吸附型填料为固定相的如硅酸镁、氧化铝等，主要通过表面的极性吸附达到分离的目的。因此，固相萃取法适用于各种极性的化合物 ;固相萃取（SPE） ;固相萃取（SPE）操作步骤：活化，上样，洗涤，洗脱。 其他方法 固相微萃取：固液吸附平衡 制备色谱法：制备HPLC分析激素残留 凝胶渗透色谱法：分子筛作用 膜分离技术：硝酸纤维，醋酸纤维等半透膜 基