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— PAGE \* Arabic 1 — cAMP 应答元件结合蛋白与痛觉调制 cAMP 应答元件结合蛋白与痛觉调制  姚繁荣，曹东元，赵晏  西安交通大学环境与疾病相关基因教育部重点实验室；西安交通大学医学院生理  学与病理生理学系, 西安 710061  E-mail：zhaoy502@http://./doc/899c78f47c1cfad6195fa772.html  中文  自身的磷酸化，在炎症、神经损伤等诱发的自发性疼痛、痛觉过敏的形成过程中具有重要的作用，本文将就此方面的研究进展加以综述。  一、 CREB的分子结构与调节转录功能  CREB 是一种连接于 cAMP 反应元件(cAMP response element ，CRE) 启动子部位的组成性表达转录因子，属具有基本区域和 C-端亮氨基酸拉链(bZIP)的转录因子大家族成员。bZIP 蛋白家族根据功能分为若干亚家族, 其中 CREB、CREM、ATF-1 为同一亚家族成员，主要对 cAMP 等信号发生应答反应。CREB 蛋白家族在诱导所有真核细胞基因表达中起重要作用。CREB 磷酸化可启动靶蛋白基因转录，最终提高突触效力。Jun、Fos 等早期应答因子亚家族启动子区域包含一个 CRE 基序，包括c-fos、bcl- 2、Mcl 1和interleukin- 6(Herdegen 和Leah, 1998)。现已鉴定出 CRE 回文序列：5-TGACGTCA-3，此序列是转录因子CREB 的结合位点。CREB 磷酸化机制仍不清楚，但在这种修饰过程中存在一个将 CREB 由不活动状态转变为活性状态的构象改变 (Usukura 等. 2000)。磷酸化 CREB 可能通过补充激活剂（例如 CREB 结合蛋白）加强转录。  CREB可调节与外周损伤和应激刺激后神经元可塑性变化有关的早期即刻基因和一些晚期效应基因功能，因其能够调节基因转录而又被称为调节转录核因子。CREB与即刻早期基因（immediate-early genes，IEGs）编码的蛋白不同，IEGs 受刺激诱导可以快速合成新的蛋白（如Fos、Jun或者Krox），发挥转录因子或者转录调节因子的作用；而CREB受刺激后只需通过活化原有的CREB发挥作用。细胞内 CREB 有两种形式：单体和二聚体，二聚体 DNA 亲合力与转录活性均明显高于单体，两者之间可以转化。CREB丝氨酸残基（Ser133）上进行的磷酸化作用在转录活化中起关键作用(Ji等. 2001)。CREB 因磷酸化作用活化后，以二聚体的形式结合到 CRE 的目标基因序列上，从而调节基因转录，此过程由与亮氨基酸拉链直接相连的氨基末端氨基酸序列介导，这一区域富含赖氨酸和精氨酸。磷酸化与脱磷酸化是调节 CREB 的重要机制之一。  二、CREB参与痛觉有关的基因调控  研究表明，CREB 作为管家基因，在神经系统中参与多种生物功能的调控，  - 2 -  如神经细胞的兴奋等。CREB 通过特异性 DNA 共有序列 CRE 激活c-jun 和c-fos ，从而调节 IEGs 或一些晚期效应基因。c-fos 编码的 Fos 蛋白作为转录调节因子，广泛参与神经系统中多种递质的转录激活作用，CREB 磷酸化在c-fos 诱导中具有重要作用。在许多疼痛基因如：c-fos、生长抑素以及神经激肽1受体（NK1）基因中存在 CRE 启动子，组织损伤后被激活(Wei 等. 2002)。慢性缩窄性损伤(chronic constriction injury，CCI)和福尔马林皮内注射引起的炎症均可引起脊髓背角神经元早期磷酸化 CREB（pCREB）增加，同时也可诱导脊髓背角c-fos和 jun-D细胞瞬间升高(Fundytus.2001)。大鼠单侧爪部注射福尔马林后双侧脊髓神经元 CREB 磷酸化增加，但 c-Fos 诱导表达增加主要出现在同侧；另外在脊髓同一区域内磷酸化 CREB 阳性细胞的数量比 c-Fos 阳性神经元多，这表明 CREB 与其它基因对伤害性刺激的反应有所不同。CREB 阴性转基因小鼠活化淋巴细胞c-fos 表达显著降低也证明了这一点(Barton 等. 1996)。因此，伤害性刺激后 CREB 磷酸化可能是一个比c-fos 表达更好代表神经元活动的指标，因为它的诱导更加迅速和敏感(White 等. 2000)。pCREB 通过 c-jun和c-fos 调节即刻早期基因或者一些晚效应基因的转录，因此 CREB 磷酸化应该比c-jun和 c-fos 激活要早一些。但是，坐骨神经部分结扎（partial sciatic nerve li