食用菌母种制作-实验一.pdfVIP

实验一 食用菌母种制作 一、目的要求 : 1、了解母种培养基制作过程，理解灭菌原理 ; 2、掌握母种培养基的制备方法； 3、了解无菌操作基本原理，掌握母种的无菌接种培养方法。 4 、了解和掌握食用菌组织分离法的方法步骤； 5、熟练分离出栽培用菌种 . 二、主要仪器设备及药品材料： 灭菌锅、超净工作台、酒精灯、电炉、铝锅、漏斗、纱布、菜刀、砧板、烧 杯、捆扎绳、硅胶试管塞、试管 (18x180mm）、手术刀、镊子、 75％酒精、 马铃薯、葡萄糖、琼脂、平菇子实体。 三、实验步骤与方法 : ①培养基的制作 1 PDA培养基配方 马铃薯 200 克, 葡萄糖 20 克，琼脂 20 克, 水 1000 毫升. 2 。 母种培养基的配制 (1) 熬制。马铃薯洗净，挖芽去皮。称取 200 克，切成玉米大小颗粒或薄 片. 量筒量取 1000 毫升水，铝锅中煮沸后记时 30 分钟。四层纱布过滤于量杯 中。滤液倒入锅中文火加热，加入葡萄糖和琼脂，不断搅拌，直到琼脂溶化。 补足水量至 1000 毫升。 (2) 分装试管。将熬制的培养基用小漏斗趁热分装。培养基高度为试管长 度的 1/5 左右，注意避免培养基沾于试管口外。分装完成后，盖紧硅胶塞。 （3）捆把 .7 支试管为一捆 , 用牛皮纸包裹试管口，用捆扎绳扎紧。贴上 标签, 准备灭菌。 （4) 灭菌 . 注意加足水量和排气 , 灭菌完成后降压不能太快 . (5 ）摆斜面，培养基长度约为试管长度的 1/2 。斜面试管上覆盖洁净的厚 毛巾或几层纱布，防止试管内产生过多的冷凝水 . 1 / 24 ①菌种分离与培养 （1) 种菇选择。选取无杂菌感染，无病虫害，出菇均匀 , 适应性强的子 实体，要求个体健壮，朵大肉厚，外形规整，出菇早，约七八成熟的新鲜 子实体。子实体采收后切去大部分菌柄，放入干净器皿内备用。 （2 ）母种分离（组织分离法 ). 在分离前用 75%的酒精棉球擦菇体进行 表面消毒， 在超净工作台内将子实体撕开， 用消毒刀片在菌盖与菌柄交接 处的组织上取一小块 （绿豆大小）移至试管斜面培养基的适当位置， 迅速 塞上硅胶塞。将分离的试管放在室内避光培养 7-8 天, 检查菌丝生长情况。 四、实验结果 每人制作平菇母种一支 . 记录母种菌丝的生长情况 . 五、作业 1. 食用菌菌种分离有哪些方法？实际生产中最常用的方法是哪一种？该 方法有何优点？ 2. 组织分离法制作母种成功的关键是什么？在操作中如何避免母种制作 失败? 2 / 24 实验二 食用及药用菌原种制作技术 目的要求： 1、了解原种培养基的配制原理及过程 ; 2、掌握玉米粒原种的制作方法。 重点与难点 : 重点: 母种培养基制作过程 ; 无菌操作 ; 食用菌组织分离法制作菌种 . 难点： 食用菌组织分离法制作菌种 . 教学方法与手段： 本次课主要采取讲授法和讨论法，在学生实验过程中辅以个别指导进行教 学。 实验内容 : 1、按比例计算、称取各组分； 2、添加、混合均匀各组分 ; 3、培养料水分、 pH调节、装袋； 4 、原种培养基灭菌；