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关键词：碱性磷酸酶，基因表达，载体，大肠杆菌， 关键词：碱性磷酸酶，基因表达，载体，大肠杆菌，SDS 编号:分类号：Q78 编号: 本科生基因工程实验论文 碱性磷酸酶基因表达载体的构 建及在大肠杆菌中的表达 指导教师： 王郑 学 生： 阿迪雅 专 业： 生物工程 年 级： 2012级 2015 年 8 月 16 0 碱性磷酸酶基因表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达 摘要 碱性礎酸0^( alkaline phosphatase, A P)是一包含2个Zn八 和1个的金属酶，纯 化后的AP被广泛用于生命和医学科学等领域，如蛋白质标记、分子生物学及酶标记免疫分 析等，是基因工程常用的工具酶。该酶广泛存在于动物、植物、微生物体內，在磷生物地球 化学循环过程中有重要作用。本文主要介绍利用基因工程实验技术操作碱性磷酸酶基因，将 pET-44a-BAP质粒上的碱性礎酸酶基因用PCR扩增出1369bp的碱性磷酸激酶基因片段，与 PMD19-T载体连接后导入感受态的DH5a菌中筛选鉴定。用双酶切切下碱性磷酸激酶的成熟 基因片段，插入带有6个组氨酸标签的原核表达载体pET-his,导入BL(21)DE3感受态菌 中诱导表达戚性磷酸激酶蛋白质，用SDS鉴定。 TOC \o 1-5 \h \z 引言 4 1实验材料 5 1试剂 5 1?2仪器 5 1.3试验用具 5 1?4菌种 5 1?5质粒 5