基因工程复习提纲完善.pdfVIP

复习提纲 1． 什么是基因？ 基因： DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。 2 ． 基因工程的诞生 基因工程诞生于 1973 年。 1973－1974 年，美国科学家科恩等以大肠杆菌为材料， 成功地进行了三次基因工程试验。 试验结果证明， 用基因工程可以打破不同物种间在亿万年中形成的天然屏障，任何不同 种类生物的基因都有可能通过基因工程技术而组合到一起。 人类进入了激动人心的基因 工程时代。 3 ． 基因工程的定义及三大基本元件。 定义： 基因工程是指重组 DNA技术的产业化设计与应用， 包括上游技术和下游技术两大 组成部分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组 DNA技术）； 而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。 三大基本元件：限制性核酸内切酶（ restriction enzymes ）/DNA 连接酶（ ligase ）/ 基因工程载体（ vector ） 4 ． 基因工程的研究内容 (1) 从生物有机体复杂的基因组中，分离出带有目的基因的 DNA片段； (2) 在体外， 将带有目的基因的 DNA片段连接到能够自我复制并具有选择标记的载体分 子上，形成重组 DNA分子 ; (3) 将重组 DNA分子引入（转）到受体细胞 ( 亦称宿主细胞或寄主细胞 ); (4) 从大量的细胞繁殖菌落中，筛选出具有重组 DNA分子的细胞克隆 ; (5) 将目的基因克隆到表达载体上，导入寄主细胞，使之在新的遗传背景下实现功能表 达，产生出所需要的物质。 5 ．基因工程的技术准备及技术支撑。 技术准备 技术支撑： 核酸凝胶电泳技术 核酸分子连接技术 / 细菌转化技术 /DNA序列分析技术 / 寡核苷酸合成技术 / 基因定点突变 技术 / 聚合酶链式反应（ PCR）技术 5 ． 基因工程的基本用途 分离、扩增、鉴定、研究、整理生物信息资源 大规模生产生物活性物质 设计、构建生物的新性状甚至新物种 基因工程在农业生产中的应用 1. 提高植物的光合作用效率 2. 提高豆科植物的固氮效率 3. 转基因植物 4. 转基因动物 基因工程在工业中的应用 1. 纤维素的开发利用 2. 酿酒工业 基因工程在医药上的应用 1. 用转基因植物或动物生产药物 2. 用微生物生产药物 3. 设计高效高特异性的生物制剂 4. 研制疫苗 5. 基因诊断 6. 法医鉴定 7. 基因治疗 基因工程在环境保护中的应用 1. 检测水污染 2. 生物降解 7．核酸酶的分类 1）根据核酸底物分 RNA酶（ Rnase）/DNA 酶（ Dnase）/ 底物非专一性核酸酶； 2 ）根据作用方式分 内切核酸酶（ endonuclease ）/ 外切核酸酶（ exonuclease ）； 3) 根据对底物碱基专一性分 碱基专一性核酸酶（切割部位的碱基序列高度专一性） 非碱基专一性核酸酶（切割部位的碱基序列随机性） 8 ．细菌中的防卫系统：限制与修饰现象。 （1）细菌在其感受态的生理条件下，很容易吸收外源 DNA进入体内。这种感受态可以 是人为的，也可以是在自然条件下发生的。如果细菌不加限制地接受所有的外源 DNA， 细菌本身就会很快发生遗传变异甚至死亡。 （2 ）限制性核酸内切酶：可以帮助细菌限制外来 DNA的入侵 （3 ）甲基化酶：对该特异位点的碱基进行甲基化修饰，被修饰的 DNA就不再被相应的 限制酶切割了。 （4 ）细菌自身的