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第八章 微生物遗传;; 生物的各项生命活动都有它的物质基础。
生物遗传的物质基础是什么呢?; 根据现代细胞学和遗传学的研究得知,控制生物性状的主要遗传物质是脱氧核糖核酸(DNA)。;8.1 遗传的物质基础;1. 转化实验(transformation);1.将无毒的RⅡ菌注入,小鼠不死,分离到RⅡ菌;3.将加热杀死(65℃)的S Ⅲ 菌注入,小鼠不死,分离不到S Ⅲ 菌;分析:这些活的有毒型细菌是怎么来的呢? ; 但是,转变是怎么产生的呢?分明是活的无毒型细菌受到了死的有毒型细菌的影响,因为它们是一起注入小家鼠体内的。;1944年,美国的生物学家艾弗里(Avery)、 麻克里奥(C.M.Macleod)和麦卡第(M.J.McCarty)合作,在格里菲思的肺炎双球菌转化实验的基础上进行了细致的工作 。;2. T2噬菌体的感染实验;二、RNA作为遗传物质
1956年,烟草花叶病毒的拆分与重建实验。实验的过程:
1、用表面活性剂处理标准TMV,得到它的蛋白质;
通过弱碱处理TMV的变种HR(外壳蛋白的氨基酸组成与标准株存在2-3个氨基酸的差别)得到它的RNA;
2、通过重建获得杂种病毒;(标准TMV抗血清使杂种病毒失活,HR抗血清不使它失 活,证实杂种病毒的蛋白质外壳是来自TMV标准株;)
3、杂种病毒感染烟草产生HR特有的病斑,说明杂种病毒的感染 特性是由HR的RNA所决定,而非二者的融合;
4、从病斑中一再分离得到的子代病毒的蛋白质外壳是HR蛋白质, 而不是标准株的蛋白质外壳。;8.2 微生物基因组;微生物与人类基因组计划;;;双链环状的DNA分子,在细胞中以紧密缠绕成的较致密的不规则小体形式存在于细胞中,该小体称为拟核,其中结合有类组蛋白蛋白质和少量RNA分子,使其压缩成一种手脚架形的致密结构(4.7×106 bp)。
1997年,Wisconsin大学的Blattner等人完成了大肠杆菌基因组的测序。 ;① 连续基因:按genome推测基因数目和实际得到的几乎一致。一般不含内含子,遗传信息是连续的而不是中断的。 ;③结构基因单拷贝,rRNA基因多拷贝。如大肠杆菌有7个rRNA操纵子,且多位于DNA的双向复制起点附近。
优点:短时间内大量合成核糖体。
④ 重复序列少而短。
原核基因组存在一定数量的 重复序列,一般比较短,为4-40个碱基。 ;1996年完成基因组测序,证实了1977年由Woese等人提出的三届学说。
特点:
① 基因结构类似于真细菌(环形染色体,含操纵子结构,有多个rRNA、tRNA基因,无内含子)
② 负责信息传递功能的基因类似真核生物(尤其是转录起始系统)(启动子的位置与结构TATAbox位于起始位点上游25-30bp处;RNA聚合酶类似于真核生物RNA聚Ⅱ、Ⅲ;翻译延伸因子EF-Ia、EF-2与真核生物相似。)
总之,只有40%序列与真细菌、真核生物有同源性。 ; 1997年完成测序,13.5×106 bp,共16条染色体。
特点:
(1)不连续基因:基因之间有间隔区,内部有内含子。
(2)不形成操纵子;
(3)高度重复基因
① 同源性DNA重复序列(遗传丰余)
② tRNA ,4-30个/chr, 250copier 。
③ rRNA ,XⅡ染色体近端粒处,100-200copy。;;8.3 质粒与转座因子;3、质粒的性质和主要类型
质粒相对持家基因而言为非必需基因,只是在某些条件下,质粒能赋予宿主细胞以特殊的机能;可随细胞分裂恒定地传给子代。;(1)F因子(fertility factor);③ 类型: F+ 、 F- 、Hfr(高频重组菌株)、F′(携带不同基因的F因子或带有F′的菌株。)
④ F因子又称为附加体(episome):
既可以游离态( F′ ),又可以整合态(Hfr)存在(与 核染色体整合与脱离的功能)。
⑤ F因子存在:除E.coli等肠道细菌外,还存在于Neissevia (奈球菌)、Streptococus(链球菌)、 Haemophzyus(嗜血 杆菌属)等。;(2)R因子(resistance factor);由相连的两个DNA片段组成。即
RTF 抗性转移因子(11x106Da)与
抗性决定质粒(几百万直至100x106Da,如Amp、 Pen、Cam、 Str、Kan和Sul等基因)
在痢疾杆菌、沙门氏杆菌、弧菌及芽孢杆菌及萄葡球菌等属中均存在之。;R plasmid;(3)Col质粒;Col质粒可编码一种细菌蛋白,使持家基因不受大肠杆菌素的伤害。 ;毒性质
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