北京大学医学部攻读硕-博士学位研究生课题研究计划书.pdfVIP

北京大学医学部 博 攻读 士学位研究生课题研究计划书 硕 研 究 李玉霞 学 号 1411210743 年 级 2014级 院 （部）北京大学/香港科技大学医学中心 专 业 医学生物化学与分子生物学 导 师 方征宇 课题研究开始日期: 2015年 03 月 09 日 北京大学研究生院医学部分院培养办公室制表 说 明 一、本计划书由研究生本人在本学科内作过开题报告后填 写，一式三份；经院(部)主管部门批准后一份留教研室， 一份留院（部）主管部门，一份送研究生院医学部分院 培养办公室备案。 二、计划批准后不得随意更改。如有特殊情况确需变更者， 需填写变更报告，逐级审批。 1 研究课题名称 黑色素瘤顺铂获得性耐药相关 microRNA筛选及其功能的研究 研究课题的目的、理论与实际意义、国内外研究情况简介 课题的目的： 1、构建黑色素瘤顺铂获得性耐药细胞株，与其原始株进行 microRNA的高通量筛选比较，找到 耐药相关的 microRNA，作为潜在的治疗靶点。 2、分析耐药相关 microRNA通过调控哪些基因的表达来影响黑色素瘤细胞的耐药性，阐明其分 子机制。 理论与实际意义： 近几十年来, 恶性黑色素瘤在全球的发病率迅猛升高 ,成为所有恶性肿瘤中发病率增长 最快的肿瘤,年增长率几乎达到 35% 。其中白色人种发病率明显高于其他人种, ,我国和日本 等亚洲国家的黑色素瘤发病率与欧美国家相比相对较低 ,但近年来其发病率呈迅猛上升趋 势。恶性黑色素瘤治疗方法主要有手术治疗、放射治疗、化学药物治疗及生物免疫治疗等。 化疗在恶性黑色素瘤治疗中仍占有重要地位。目前化疗药物主要有顺铂、长春新碱和组蛋 白去乙酰化酶抑制剂等。顺铂是现在临床上多种化疗方案中的主要药物之一,通过与癌细胞 的脱氧核糖核酸发生交叉联结 ,诱导肿瘤细胞的凋亡而起抗癌作用 ,属细胞增殖周期非特异 性药物，但是多种恶性黑色素瘤常会对顺铂产生天然或获得性耐药, 因而提高顺铂的抗肿瘤 作用,解决顺铂耐药在恶性黑色素瘤的化疗中有着重要的实际意义。 顺铂耐药机制,主要包 括细胞内药物积累的减少，DNA损伤修复作用增强, 凋亡通路的变化以及一些 microRNA 的 异常表达。由于microRNA的表达易于调控，如果能找到黑色素瘤中与耐药相关的 microRNA， 可建立以此为靶点的干预手段。 国内外研究情况简介： 在其他肿瘤细胞中，已经有人验证出一些 microRNA 的变化会影响肿瘤对顺铂的敏感 性，而目前关于 microRNA在黑色素瘤顺铂获得性耐药机制中的作用研究较少。 2 主要研究内容 研究内容1：构建黑色素瘤顺铂耐药株 选取了七种黑色素瘤细胞系M7、M21 、SK-MEL-103、M29 、A375、M8 、SK-MEL-19依 次检测对顺铂的敏感性,在对顺铂比较耐受的细胞株中选取了A375、M8、SK-MEL-19构建了顺 铂耐药株并将A375、M8做了microRNA的表达谱芯片。 研究内容2：黑色素瘤顺铂耐药株与原始株microRNA芯片分析及验证 通过分析 microRNA 表达谱芯片，对黑色素瘤顺铂耐药株中异常表达的microRNA 用荧光 定量PCR进行验证，确定要研究的microRNA。 研究内容3: 顺铂耐药相关基因反向筛选预测microRNA 查阅文献，汇总顺铂耐药相关基因，在黑色素瘤顺铂耐药株与原始株中用荧光定量 PCR 验证，根据耐药基因的变化反向预测microRNA。