吉林大学《生物化学(含实验)》期末考试备考资料(十四).pdfVIP

吉大《生物化学（含实验）》（十四） 第十四章 基因表达调控 乳糖操纵子 一、结构和功能 细菌相关功能的结构基因常连在一起，形成一个基因簇。它们编码同一个代谢途径中的 不同的酶。一个基因簇受到同一的调控，一开俱开，一闭俱闭。也就是说它们形成了一个被 调控的单位，其它的相关功能的基因也包括在这个调控单位中，例如编码透过酶的基因，虽 它的产物不直接参与催化代谢，但它可以使小分子底物转运到细胞中 乳糖分解代谢相关的三个基因，lacZ、Y、A 就是很典型的是上述基因簇。它们的产物可 催化乳糖的分解，产生葡萄糖和半乳糖。它们具有顺式作用调节元件和反式作用调节基因 三个结构基因图的功能是： lacZ编码β-半乳糖苷酶，此酶由 500kd 的四聚体构成，它可以切断乳糖的半乳糖苷键， 而产生半乳糖和葡萄糖 lacY 编码β一半乳糖苷透性酶，这种酶是一种分子量为 30kDd 膜结合蛋白，它构成转运 系统，将半乳糖苷运入到细胞中 lacA编码β-半乳糖苷乙酰转移酶，其功能只将乙酰-辅酶A 上的乙酰基转移到β-半乳糖 苷上 无论是 lacZ发生突变还是 lacY发生突变却可以产生 lac-型表型，这种 lac—表型的细胞 不能利用乳糖 lacZ-突变体中半乳糖苷酶失去活性，直接阻止了乳糖的代谢 lacY-突变体 不能从膜上吸取乳糖 这一个完整的调节系统包括结构基因和控制这些基因表达的元件，形成了一个共同的调 节单位，这种调节单位就称为操纵子（opron）。操纵子的活性是由调节基因控制的，调节基 因的产物可以和操纵子上的顺式作用控制元件相互作用 lacZ、Y、A 基因的转录是由 lacI基因指令合成的阻遏蛋白所控制 lacI一般和结构基因 相毗连，但它本身具有自己的启动子和终止子，成为独立的转录单位。由于 lacI 的产物是可 溶性蛋白，按照理说是无需位于结构基因的附近。它是能够分散到各处或结合到分散的 DNA 位点上（这是典型的反式-作用调节物。） 通过突变的效应是可以将结构基因和调节基因相区别的，结构基因发生突变，细胞中就 失去这些基因合成的蛋白。但是调节基因发生突变会影响到它所控制的所有结构基因的表 达。调节蛋白的突变的结果可以显示调节的类型 lac 基因簇是受到负调节（negative regulation）。它们的转录可被调节蛋白所关闭 若调节蛋白因突变而失活就会导致结构基因组成型表达。表明调节蛋白的功能是阻止结构基 因的表达，因此称这些蛋白为“阻遏”蛋白。 乳糖操纵子的阻遏蛋白是由 4 个亚基（38kDa）组成的四聚体。一个野生型细胞中大约有 10 个四聚体。调节基因转录成单顺反子的 mRNA，它和操纵子的比率与 RNA 聚合酶和启动子之 比是相似的。 lacI 的产物称为 lac 阻遏物（lac repressor），其功能是和lacZ、Y、A 基因簇 5′端的 操纵基因（Olac）,操纵基因位于启动子 (Plac)和结构基因（lac2yA）之间。当阻遏物结合在 操纵基因上时就阻碍了启动子上的转录起始。Olac 从mRNA 转录起始点的上游-5 处延伸到转录 单位+21 处。这样它和启动子的末端发生重叠。新近的观点认为阻遏物影响了 RNA 聚合酶，从 操纵基因和启动子二者相关位置来看阻遏物结合在DNA 上会阻碍RNA 聚合酶转录结构基因。但 我们必须注意其它一些操纵子上的操纵基因其位置和乳糖操纵子并不相同，因而阻遏蛋白可 以通过多种方式与操纵操纵基因结合阻断转录。 二、阻遏蛋白的活性受到小分子诱导的控制 细菌对环境的改变必需作出迅速的反应。营养供给随时都可能发生变化，反复反常。要 能得以幸存必需具有可以变换不同代谢底物的能力。单细胞真核生物也同样生活在不断变化 环境中；而更为复杂的多细胞生物都具有一套恒定的代谢途径，而无需对外部环境作出反 应。 在细菌中是很需要灵活性，也需要很经济，因为细菌遇到合适的环境就大量消耗营养对 其本身也是不利的。在缺乏底物时就不必要合成大量相关的酶类，因此细菌产生了一种调节 机制，即在缺乏底物时就阻断酶的合成途径，但同时又作好了准备，一旦有底物存在就立即 合