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岛津液相色谱维护培训;2;3;第一部分 液相色谱故障排除经验 液相色谱常见问题 ;LC 10Avp;6;LC-20A Prominence;液相色谱简易流程图;1.（简单）等度系统;储液瓶;储液瓶;液相色谱故障排除经验;常见故障因素;平常保养;液相色谱常见问题;压力;压力高时;容易发生堵塞的部件;压力低;压力波动;经常漏液的部件;保留时间不稳定;噪音大;基线漂移;峰形问题;鬼峰;第二部分 日常使用注意点 硬件基础知识 容易出故障的部件及常见故障的排除 ;液相系统维护流程图;一、输液部分;管线选择;管线材料;接头;死体积;选择原则 采用 “HPLC” 级溶剂 避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂 对试样有适宜的溶解度 溶剂粘度要小 与检测器相匹配 ;溶剂的等级 HPLC级 优级纯 分析纯;水 / 甲醇梯度 ODS 柱;水的等级 纯化水 蒸馏水 去离子水;选择缓冲液的步骤 1 .确定最佳分离状态时的流动相pH 2 .选择具有与流动相的pH相近的pKa 的缓冲液（即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液） 3 .确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收 （在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和 柠檬酸的缓冲液）;代表性弱酸的pKa;缓冲液的使用;流动相的更换;过滤：0.45um或更小孔径滤膜 目的：除去溶剂中的微小物理颗粒，避免堵塞色谱柱，尤其是在使用无机盐配制的缓冲液的时候必须过滤 脱气：除去在流动相中溶解或彼此混合而产生的气泡 气泡对测定的影响： 1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积 2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形 3）检测器中的气泡产生基线波动 无在线脱气应注意： 1）每天脱气 2）如使用氦脱气，对混合溶剂脱气时间不能过长;LC-20A 日常维护 －输液泵;LC-20A 日常维护 －输液泵LC-20AD/AB;LC-20A 日常维护 －输液泵LC-20AT;吸滤头;吸滤头;泵工作示意图;单向阀;LC-20AT;LC-20AD;单向阀;单向阀结构;LC20AT主入口阀 部件号:228-45704-92;单向阀清洗;故障：宝石球粘附于垫片 表现：泵无法吸液或排液，流??不通 措施：1）用针筒抽出口单向阀以产生负压，使宝石球 与垫片分开 2）拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声波清洗;柱塞密封圈;柱塞密封圈的更换;柱塞杆;柱塞杆更换;柱塞隔膜;线路过滤器;过滤器的更换;排液阀漏液 ;LC-20A系列泵 部件号：228-45574-91;混合器;输液泵;梯度洗脱装置： 高压梯度：用两台高压输液泵将两种溶剂输入 低压梯度：在常压下将两种溶剂（或多元溶剂）混合，然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。;分析时间长;95%;梯度洗脱形式： 线性梯度：在梯度洗脱时，流动相强度的变化和时间成线性比例 指数梯度：在梯度洗脱时，流动相强度随时间的变化呈指数关系 折线梯度：;梯度洗脱形式的选择;梯度洗脱： 优点：可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度 注意事项： 溶剂的纯度要高，否则梯度洗脱的重现性差 梯度混合的溶剂互溶性要好 梯度洗脱应使用对流动相组成变化不敏感的选择性检测器（如 紫外吸收检测器或荧光检测器），而不能使用对流动相组成变 化敏感的通用型检测器（如示差折光检测器） 查看空白实验的数据 遵守分析周期。（最初的分析数据不采用） ;1. 使用流动相溶解样品 -- 减少溶剂峰，尤其是组分峰靠近溶剂峰时由为重要 -- 保证样品在流动相中的溶解度，避免样品在系统中尤其在柱中产生沉淀 2. 进样前最好使用0.45um 的膜进行过滤 如果样品很脏，要使用0.2um的膜进行过滤 3. 对于含有复杂基质的样品，最好过前处理小柱后再进样。;混合器过滤组件;二、进样部分;进样器; 手动进样器的原理图;7725/7725i手动进样器结构图;进样量和检测器响应的关系示意图;交叉污染的原因;进样口清洗;手动进样器;故障处理;三、分离部分;色谱柱的日常保养;峰的变形;峰产生有肩或分叉的原因;色谱柱柱效降低原因;滤片或填料堵塞;样品或流动相中杂质吸