演示文稿1基因工程的基本操作程序 .pptx

基因工程转基因生物什么是基因工程？ 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。该技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。练习：基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定1.1 DNA重组技术的基本工具准确切割DNA的工具（“分子手术刀”） ——限制性内切酶DNA片段的连接工具（“分子缝合针”） ——DNA连接酶基因转移工具（“分子运输车”） ——运载体一、限制性核酸内切酶—“分子手术刀”概述：切割DNA的工具是限制性核酸内切酶，又称限制酶。这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。现在已分离出约4000种限制酶。限制酶能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列。一、限制性核酸内切酶—“分子手术刀”限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且在特定的位点切割DNA分子。（专一性）特点：例如：大肠杆菌(E.coli)的EcoRⅠ限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。黏性末端回文序列黏性末端9、我们的市场行为主要的导向因素，第一个是市场需求的导向，第二个是技术进步的导向，第三大导向是竞争对手的行为导向。10、市场销售中最重要的字就是“问”。11、现今，每个人都在谈论着创意，坦白讲，我害怕我们会假创意之名犯下一切过失。12、在购买时，你可以用任何语言；但在销售时，你必须使用购买者的语言。13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成。14、市场营销观念：目标市场，顾客需求，协调市场营销，通过满足消费者需求来创造利润。15、我就像一个厨师，喜欢品尝食物。如果不好吃，我就不要它。16、我总是站在顾客的角度看待即将推出的产品或服务，因为我就是顾客。17、利人为利已的根基，市场营销上老是为自己着想，而不顾及到他人，他人也不会顾及你。一、限制性核酸内切酶—“分子手术刀”DNA分子如何切割DNA分子呢？切割DNA分子实质是断开两个核苷酸之间的磷酸二酯键。磷酸二酯键思考：（1）在一个DNA分子片段中，含有 个游离的磷酸基团，如果是环状DNA分子呢？切割DNA分子后形成什么呢？小结：（1）限制酶的种类、分布、特点、作用部位、作用结果；（2）练习产物： 黏性末端（在中轴线两侧切割DNA） 平末端（在中轴线处切割DNA）一、限制性核酸内切酶—“分子手术刀”二、DNA连接酶—“分子缝合针”（1）E·coli DNA连接酶（大肠杆菌）（1）E·coli DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来。1.酶的种类：（2）T4 DNA连接酶都能连接黏性末端和平末端，但连接平末端之间的效率比较低。（2）T4 DNA连接酶（噬菌体）两种酶的区别：2.酶的作用：将双链DNA分子片段“缝合”起来，恢复两个核苷酸之间的磷酸二酯键。思考：比较 (考点一) 限制性内切酶与DNA连接酶跟踪演练：二、DNA连接酶—“分子缝合针”GC磷酸二酯键ATATTA磷酸二酯键TACG思考：比较DNA连接酶和DNA聚酶？DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的单链核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键,需要摸板。DNA连接酶是连接两个双链DNA片段的末端，形成磷酸二酯键,不需要摸板。DNA复制三、基因进入受体细胞的载体—“分子运输车”　要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去。能将外源基因送入细胞的工具就是运载体。常用的载体是质粒，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。作为基因工程运载体的条件①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。②具多种限制酶切点，以便与外源基因连接。③具有某些标记基因，便于进行筛选。④载体是安全的，不能对受体细胞有害。⑤载体DNA分子大小应合适，以便提取和在体外进行操作。。四、典型例题解读——基因工程与细胞工程（2009高考-理综 山东） 35. 人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疾苗生产和抗体制备的流程之一如下图：请回答：（1）过程①代表的是 。（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用 和 两种工具酶。（3）过程③采用的实验技术是 ，获得的X是 。（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图 中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该 传染病疑似患者确诊时，可以疑似患者体内分 离病毒，与已知病毒进行 比较；或用图中 的 进行特异性结合检测。参考答案：（1） 逆转录 （2） 限制性核酸内切酶（限制酶\限制性内切酶）