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物体表面微生物监测标准操作 规程 (总 2 页) -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1 -CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除 物体表面微生物监测标准操作规程 1.目的 规范物体表面采样及监测标准操作规程。 2.适用范围 2.1 医院感染高风险部门，每季度进行检测。 2.2 发生有暴发流行。 3.采样时间 潜在污染区、污染区消毒后采样，清洁区根据现场情况确定。 4.职责 医院感染管理专职人员或兼职人员应遵守本程序。 5.采样面积 2 2 2 被采表面＜100cm ，取全部表面；被采表面≥100cm ，取 100cm 。 6.采样方法 用 5 cm×5 cm 灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌 0.03 mol/L 磷酸盐缓冲液（PBS）或生理盐水采样液的棉拭子 1 支，在规格板内横竖往 返各涂抹 5 次，并随之转动棉拭子，连续采样 1~4个规格板面积，剪去手接 触部分，将棉拭子放入装有 10 ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体 则采用棉拭子直接涂抹物体采样。若采样物体表面有消毒剂残留时，采样液 应含相应中和剂。见表（5.5）。 表 5.5 化学消毒剂的常用中和剂 消毒剂 相应中和剂 浓度（%） 含氯消毒剂 硫代硫酸钠 0.2～1.0 复合含氯消毒剂 硫代硫酸钠+吐温 80+卵磷脂 0.2～1.0+2.0+0.3 过氧乙酸 硫代硫酸钠 0.1~0.5 过氧化氢 硫代硫酸钠+吐温 80+卵磷脂 0.5～1.0+2.0+0.3 碘酊碘伏 硫代硫酸钠+吐温 80 0.5+2.0 甲醛 双甲酮+马林 1.0+0.6 戊二醛 甘氨酸+吐温 80 2.0+2.0 乙醇 吐温 80+卵磷脂 3.0+0.3 氯已定 吐温 80+卵磷脂 苯扎溴铵 吐温 80+卵磷脂 注：配制各种中和剂均使用磷酸盐缓冲液（PBS）为基础溶剂。 7. 检测方法 将采样管充分振荡后，取不同稀释倍数的洗脱液 1.0ml接种平皿，将冷 至 40℃~45℃的熔化营养琼脂每皿倾注 15ml~20ml；36℃±1℃恒温箱培养 48h，计数菌落数，必要时分离致病性微生物。 8.结果计算： 8.1 规则物体表面 物体表面菌落总数计算方法见式（A.2）： 平均每皿菌落数×洗脱液稀释倍数 2 物体表面菌落总数 (CFU/c )= 2 （A.2） 采样面积 (c ) 8.2 小型物体表面的结果计算，用 cfu/件表示。 9.结果判定 2 9.1 I、II 类环境：物体表面细菌菌落总数≤5 cfu/c