试论DNA重组质粒的构建.pptxVIP

DNA重组质粒的构建;基因克隆 gene cloning 应用酶学的方法，在体外将目的基因与载体DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分子（重组体），继而通过转化或转染宿主细菌或细胞、筛选出含有目的基因的转化子细菌或细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子拷贝。 核心技术：DNA重组技术 （ recombinant DNA technique ） ;基因克隆的基本程序： 分 — 切 — 接 — 转 — 筛 PCR 酶切 连接 转化转染 抗性或标记筛选 目的基因DNA片段的获得 外源DNA分子与载体DNA分子的体外重组 重组DNA分子转移到适当的受体菌或细胞 重组DNA 分子克隆的筛选和鉴定 目的基因或其表达产物的纯化和鉴定 基因克隆技术的特点： 1. 可在体外人工的, 有目的的, 根据需要进行基因的重组、表达、测序、诱变、修复； 2. 方法简便、快速、准确、特异，能保证研究与开发的需要。;基因克隆示意图;胰岛素 人生长激素 干扰素 白细胞介素2 粒细胞集落刺激因子 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 红细胞生成素 EPO 组织纤溶酶原激活剂 生长激素 促生长素 抗血友病因子Ⅷ 脱氧核糖核酸酶 葡糖脑苷脂酶 鼠单克隆抗体;例： 干扰素是治疗癌症的重要物质，