实验三死活细胞的鉴别.ppt

* * 实验三死活细胞的鉴别 第一页 一、实验目的 1.学习并掌握死活细胞鉴别的原理及方法。 2.能够辨别死、活细胞。 第二页 二 实验原理 死活细胞鉴别有许多不同的方法，其中最常用方法是台盼蓝染色排除法。 其原理是：许多酸性染料不容易穿过活细胞的质膜进入胞内，却能渗入死亡的细胞内，使其着色，以此来鉴别死活细胞。 第三页 荧光排除法 活细胞具有较强的酯酶活性，可将二丙酸酯荧光素中的荧光素分解出来，从而使细胞发出强烈的黄绿色荧光，死亡细胞由于酯酶失活，不能分解二丙酸酯荧光素，不能发出荧光。 第四页 染色排除法：染成蓝色的为死细胞 第五页 三、试剂与器材 1.材料：血细胞 2.试剂：0.4％台盼蓝溶液（生理盐水配制）、PBS。 3.器材：显微镜、血细胞计数板、载玻片、滴管等。 第六页 四、实验内容 1.血细胞悬液的制备 取一定量的新鲜血液加入20等份的PBS。 2.染色制片 取0.5ml细胞悬液放入干净试管中，加入1—2滴台盼蓝染液，混合，2min后制成临时装片，镜检。 第七页 3.结果 死细胞染成蓝色，活细胞不着色。 细胞计数：单位视野内死细胞个数、活细胞个数。 第八页 * *