中国药科大学《生物化学与分子生物学》2010年真题.pdfVIP

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中国药科大学《生物化学与分子生物学》2010年真题.pdf

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中国药科大学《生物化学与分子生物学》2010年真题 1. 目的基因的制备方法？ 2. 色氨酸操纵子的调控机制？ 3. 真核生物蛋白质翻译后加工机制？ 4. 举例说明同源重组在分子生物学领域的应用？应用之基因敲除定义基因敲除（geneknockout），是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平上设计实验，将该基因去除，或用其它顺序相近基因取代，然后从整体观察实验动物，推测相应基因的功能。这与早期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。基因敲除除可中止某一基因的表达外，还包括引入新基因及引入定点突变。既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因，也可以用正常基因敲除相应的突变基因。技术路线基因敲除是80年代后半期应用DNA 同源重组原理发展起来的一门新技术。80年代初，胚胎干细胞（ES细胞）分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年，首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到 1987 年，Thompsson 首次建立了完整的ES细胞基因敲除的小鼠模型。此后的几年中，基因敲除技术得到了进一步的发展和完善。基因敲除的技术路线如下：（1）构建重组基因载体﹔ （2）用电穿孔、显微注射等方法把重组DNA转入受体细胞核内﹔ （3）用选择培养基筛选已击中的细胞﹔ （4）将击中细胞转入胚胎使其生长成为转基因动物，对转基因动物进行形态观察及分子生物学检测。 1）能够按照人们的意愿精确修饰/改造基因组；（2 ）实现基因敲入（knock-in）和条件性基因敲除（conditional gene knock-out）；（3 ）精确制备模拟人类遗传病的动物模型：很多人类的遗传病是致病基因的错义突变生化大题 1血糖的来路去路？胰岛素和胰高血糖素调节血糖的机制？血糖的定义？ 2.蛋白质正确性的机制？ 3.设计一个实验确定哪种底物和酶的亲和力最大？？ 4基因工程原理，过程，在制药的应用？