梅毒--精校版本.docVIP

梅毒螺旋体抗体凝集实验（TPPA）操作程序 1．标本种类及收集要求 标本种类：血清 2．设备和材料 2.1设备：旋转振荡仪、精确移液器 2.2材料：梅毒螺旋体确认试剂盒。来源：富士瑞比欧梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒或者类似产品。有效期内。 2.3 试剂盒： 按说明书要求调制致敏粒子和未致敏粒子悬液。 3．原理 将梅毒螺旋体Nichols 株的精制菌体成分包被于明胶颗粒上，此种致敏颗粒与检样中的抗TP 抗体结合时可产生凝集反应。 4．试验步骤 4.1 将诊断试剂盒平衡至室温 4.2 按下述手工操作方法，迅速连贯地进行操作。定性试验只做4孔，半定量（测抗体滴度）试验做12孔。 4.3 在反应板第1孔中微量移液管取（100μl）血清稀释液，第2～4孔每孔滴1滴（25μl）。 4.4 用微量移液管取待测血清25μl加至第1孔中，然后再用微量加样器混匀后取25μl至第2孔，依次稀释至第4孔（或12孔）。此时，第1孔待测血清为1:5倍稀释，第2～4孔分别为1:10～1:40（第12孔则为10240）。 4.5 用试剂盒中的专用滴管在第3孔中滴加1滴（25μl）未致敏粒子，在第4孔中滴加1滴（25μl）致敏粒子。待测血清的最终稀释倍数第3孔为1:40，至第12孔为1:20480。 4.6 平板在平板混合器上混合30s，加盖后置室温（15℃～30 4.7 对照试验：每个试剂盒中的阳性对照血清都要与样