高中生物第三章第一节菊花的组织培养新人教选修2讲课文档.pptVIP

2、配置培养基 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml. ① 配制培养液 ② 调PH ③培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素. 第二十八页，共39页。 3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌. 1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝. （二）外植体消毒 2、消毒 ①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右. 第二十九页，共39页。 ② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗. ③消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液. 第三十页，共39页。 （三）接种 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟 1、接种室消毒 2、无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。 3、材料的切取和接种 第三十一页，共39页。 第三十二页，共39页。 4、接种注意事项 ①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75％