动物微生物学第21讲.pptxVIP

动物微生物学21 24马有智第九节 支原体 支原体(Mycoplasma)又称枝原体，是一类介于细菌和病毒之间、无细胞壁、能独立生活的最小的单细胞原核微生物。一、形态结构特点没有细胞壁的原核细胞型微生物常用姬姆萨染色，G-能通过0.45?m滤菌器二分裂繁殖为主，也可出芽繁殖能在无生命培养基中繁殖的最小微生物 二、增殖培养 培养：营养要求高，需加入10%-20%的血清、酵母浸膏等。在pH7.6～8.0间生长，低于7.0则死亡生长缓慢，需3～5天才能形成菌落。典型的菌落呈荷包蛋样支原体菌落支原体菌落形态图三、抵抗力比细菌敏感，易被消毒剂灭活对醋酸铊、结晶紫抵抗力强对青霉素、链霉素、多黏菌素等耐药对四环素、金霉素、土霉素、卡那霉素、氯霉素等敏感对放线菌素D和丝裂霉素C最敏感 支原体细菌病毒衣原体立克次体无cell培养基生长 ++---细胞壁 -+-++独立代谢 ++-++通过0.45um滤膜 +-+++需要胆固醇 +----DNA和RNA ++-++二分裂繁殖 ++-++抗生素抑制生长 ++-++1500倍光镜可见 ++-++四、所致疾病猪肺炎支原体——猪喘气病（猪地方性肺炎）禽败血支原体——禽慢性呼吸道疾病丝状支原体——牛传染性胸膜肺炎（牛肺疫）山羊支原体——山羊传染性胸膜肺炎无乳支原体——绵羊及山羊乳腺炎及关节等人肺炎支原体——人原发性非典型性肺炎猪肺炎支原体 引起猪喘气病，又称地方性肺炎，病猪表现喘气，呼吸困难，初次发病率高，死亡率亦高，尤以母猪（怀孕母猪尤甚），架子猪少。一、形态及染色特性 形态多样，液体培养常呈球状，0.2-0.5um，常常由球状单体串联形成环状，偶有新月状、长链状和丝状，以环状为主，可见两极杆菌状，姬姆萨染色良好。二、培养及生化特性30%牛心消化汤50%水解乳蛋白Hank‘s液（0.5-1%）PH7.620%健康猪血清（56℃ 30min）0.5-1%酵母浸膏1%葡萄糖酚红指示剂PH7.61/4000 醋酸铊青霉素（200units/ml））液体培养：轻度浑浊，可附着于玻璃表面。固体培养：圆形，边缘整齐，似露滴状，中间有颗粒，稍隆起的小落，中间乳头不明显，直径200-300um，最大可达400um。生化特性：分解葡萄糖产酸，不水解精氨酸和尿素。组织培养：能在鸡胚卵黄囊或猪肺单层细胞中生长繁殖，能适应于乳兔。三、抵抗力 对常用化学消毒剂敏感。15-25℃ 36h失去活力1-4℃存活4-7d-30℃ 20m冻干-25℃ 2-3y四、微生物学诊断病料：呼吸道分泌物或肺组织。分离培养： 病肺组织→剪碎→Hank‘s洗涤→液体培养基 分泌物→棉拭子→液体培养基（少量）→过滤除菌→滤液→液体培养基，37℃，5-10% CO2培养。 液体培养基→混浊→连续移植培养4-5代→培养物，规律变化时，涂镜。 5-10% CO2 固体培养基————→观察菌落（低倍镜）。 37℃ 3-10天 禽败血支原体鸡支原体病变图谱1支原体病图2一、形态及染色特性 菌体通常为球形（直径0.2-0.5um）、卵圆形或大小不等的球状体串成的链状，姬姆萨染色效果好。二、培养及生化特性液体培养基：牛心浸出液+10-20%灭能血清+醋酸铊+青霉素+酚红。pH 7.8-8.0，2-5天后出现轻度混浊。固体培养基：3-10天后，出现表面光泽透明，边缘整齐，露滴样小菌落，菌落中央有颜色较薄而致密的乳头状突起。生化特性：发酵葡萄糖产酸不产气，不发酵乳糖。二、抵抗力 一般化学消毒剂均能迅速杀死，50℃20min即被活。-30℃可存活2-4年，冻干菌种于4℃可存活7年。四、致病性 主要感染鸡和火鸡，火鸡发生气囊炎、窦炎及腱鞘炎。五、微生物学诊断（1）病料：气管渗出物，气管分泌物，窦渗出物等。（2）分离培养：病料→研磨后加青霉素等→液体培养基3天→转接→盲传3-4次→固体培养基3天→细小，煎蛋状菌落。 红细胞吸附试验： 37℃ 菌落+红细胞——→菌落表面有红细胞 红细胞吸附抑制试验： （支原体+相应抗体）+红细胞→不吸附 5-7天 鸡胚接种：7日龄卵黄囊接种—— →死亡（3）血清试验 平板凝集试验：2’ 标准抗原2滴+全血1滴——→凝集六、免疫国内有油乳剂灭活苗，国外有弱毒苗。目前防治本病垂直传播可取以下方法：卵化蛋45℃处理14h，然后迅速降至卵化温度。种鸡喂服有效药物。向蛋中注菌或药物。