酶以及酶促反应.ppt

环境pH的作用方式: 结合基团 1.影响酶的解离 催化基团 辅助因子. 2.影响底物的解离。 3.影响酶分子的构象。 第六十三页，共132页。 五、抑制剂对反应速度的影响 酶的抑制剂(inhibitor) 凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白 变性的物质称为酶的抑制剂。 区别于酶的变性 抑制剂对酶有一定选择性 引起变性的因素对酶没有选择性 第六十四页，共132页。 抑制作用的类型 不可逆性抑制 (irreversible inhibition) 可逆性抑制 (reversible inhibition)： 竞争性抑制 (competitive inhibition) 非竞争性抑制 (non-competitive inhibition) 反竞争性抑制 (uncompetitive inhibition) 第六十五页，共132页。 (一) 不可逆性抑制作用 * 概念 抑制剂通常以共价键与酶活性中心的必需基团相结合，使酶失活。 * 举例 有机磷化合物 ?? 羟基酶 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM) 重金属离子及砷化合物 ?? 巯基酶 解毒 -- -- -- 二巯基丙醇(BAL) 第六十六页，共132页。 有机磷化合物 路易士气 失活的酶 羟基酶 失活的酶 酸 巯基酶 失活的酶 酸 BAL 巯基酶 BAL与砷剂结合物 第六十七页，共132页。 （二） 可逆性抑制作用 * 概念 抑制剂以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合，使酶的活性降低或丧失；抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 * 类型 第六十八页，共132页。 １.竞争性抑制作用 定义 抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶底物复合物的形成，使酶的活性降低。 反应模式 第六十九页，共132页。 + + + E E S I ES EI E P 第七十页，共132页。 * 特点 抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力及底物浓度； I与S结构类似，竞争酶的活性中心； 动力学特点：Vmax不变，表观Km?。 抑制剂↑ 无抑制剂 1/V 1/[S] 第七十一页，共132页。 * 举例 丙二酸与琥珀酸竞争琥珀酸脱氢酶 延胡索酸 琥珀酸 琥珀酸脱氢酶 第七十二页，共132页。 磺胺类药物的抑菌机制 与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶 二氢蝶呤啶 ＋ 对氨基苯甲酸 ＋ 谷氨酸 二氢叶酸 合成酶 二氢叶酸 第七十三页，共132页。 2.非竞争性抑制 * 反应模式 第七十四页，共132页。 * 特点 抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合，底物与抑制剂之间无竞争关系； 抑制程度取决于抑制剂的浓度； 动力学特点：Vmax?，表观Km不变。 抑制剂↑ 1 / V 1/[S] 无抑制剂 第七十五页，共132页。 3.反竞争性抑制 * 反应模式 + + E S ES ESI E P 第七十六页，共132页。 * 特点： 抑制剂只与酶－底物复合物结合； 抑制程度取决于抑制剂的浓度及底物的浓度； 动力学特点：Vmax?，表观Km?。 抑制剂↑ 1/V 1/[S] 无抑制剂 ? 第七十七页，共132页。 各种可逆性抑制作用的比较 ? 第七十八页，共132页。 竞争性抑制作用与非竞争性抑制作用比较示意图： 第七十九页，共132页。 六、激活剂对反应速度的影响 激活剂(activator) 使酶由无活性变为有活性或使酶活性增加的物质。 ? 必需激活剂 (essential activator) 如多数金属离子。 ? 非必需激活剂 (non-essential activator) 如Clˉ。 第八十页，共132页。 七、酶活性测定和酶活性单位 酶的活性是指酶催化化学反应的能力，其衡量的标准是酶促反应速度(即在适宜的反应条件下，单位时间内底物的消耗或产物的生成量)。 酶的活性单位是衡量酶活力大小的尺度，它反映在规定条件下，酶促反应在单位时间（s、min或h）内生成一定量（mg、μg、μmol等）的产物或消耗一定数量的底物所需的酶量。 第八十一页，共132页。 国际单位(IU) 在特定的条件下，每分钟催化1μmol底物转化为产物所需的酶量为一个国际单位。 催