细菌噬菌体的遗传分析.pdfVIP

一、转化（ transformation ）： 概念：某些细菌通过其细胞膜摄取 周围供体 的染色体片段，将此外源 DNA 片段 通过重组整合到自己染色体组的过程。 1928 年，格里费斯 (Griffith F.) 在肺炎双球菌中发现转化现象。 1944 年，阿委瑞 (Avery O. T.) 进行肺炎双球菌转化试验； 证实遗传物质是 DNA ； 转化是细菌交换基因的方法之一。 转化的条件：细菌活跃摄取外源 DNA 分子；具备重组程序所必需的酶。 转化三种细菌：肺炎双球菌；枯草杆菌；流感嗜血杆菌。 转化的两个例子： . ① 用两个带有不同抗性的肺炎双球菌群体混合 可以发现带有双抗性的细 菌。 细菌裂解 DNA 残留 其它细菌摄取转化。 . DNA ② 枯草杆菌活细胞表面分泌 ，可被其它细胞摄取。 ㈠、供体与受体的互作： . ① 转化片断的大小： 肺炎双球菌转化： DNA 片断至少有 800 个碱基对； 枯草杆菌的转化： DNA 片断至少有 16000 个碱基对。 . DNA ② 供体 分子存在的数目： 供体 DNA 分子数目与特定基因的成功转化有关。 链霉素抗性基因转化：每个细胞含有 10 个 DNA 分子之前，抗性转化体数目一 直与 DNA 分子存在数目成正比。 原因：细菌的细胞壁或细胞膜上有固定数量的 DNA 接受座位，故一般细菌摄取 的 DNA 分子数 10 个。 ③．受体的生理状态： 感受态 是处于刚停止 DNA 合成、而蛋白质合成继续活跃进行时的状态。 活跃合成的蛋白质可使细菌细胞壁易于接受转化 DNA 。 只有感受态 受体细胞才能摄取并转化外源 DNA ，而这种感受态也只能发生在细 菌生长周期的某一时间范围内。 ㈡、转化 DNA 的摄取和整合过程： . ① 结合与穿入： DNA ( ) DNA 分子结合在接受座位上 可逆 ，可被 酶降解；接受座位饱和性。 DNA ( ) DNA 摄取 不可逆 ，不受 酶破坏。 穿入后，由外切酶或 DNA 移位酶降解其中一条链。 ② .联会： 按各个位点与其相应的受体 DNA 片段联会。亲缘关系越远，联会越小、转化的 可能性越小。 ③．整合 (重组 )： 是指单链的转化 DNA 与受体 DNA 对应位点的置换 稳定地进入到受体 DNA 。 对同源 DNA 具有特异性。 异源 DNA ，视亲缘关系远近也可发生不同频率整合。 黎德伯格等用枯草杆菌进行转化和重组试验： DNA 片段进入受体细胞后，可与受体染色体发生重组。紧密连锁的两个基因有 较多的机会在同一个 DNA 片段中 同时整合到受体染色体中。 三者并发转化的频率高，故这 3 个基因是连锁的，其中 his2 和 tyr1 连锁最为紧 密： 单交换时， 染色体开环易降解， 故不存在单交换类型； 只有双交换和偶数的多交 换才有效 。 二、接合（ conjugation）： 1. 概念：是指原核生物的遗传