植物组织培养实验室(共60张PPT).pptx

植物组织培养实验室第一页，共六十页。第一节 植物组织培养实验室 植物植物组织培养是以植物组织和细胞的离体无菌操作为基础的实验性学科，它需要在一定的实验条件和特定的实验环境下完成一系列操作，以无菌条件为重要前提，模拟植物细胞生长发育需要的各种设备、设施、培养条件，是从事本领域工作的基础。 第二页，共六十页。 一、实验室要求 环境要求：理想的植物组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污染源的地方，最好在常年主风向的上风方向，尽量减少污染。规模化生产的实验室最好建在交通方便的地方，便于产品的运送。 需考虑两个方面：一、所从事实验的性质 二、实验室规模第三页，共六十页。 实验室设置的基本原则：科学、高效、经济和实用。 实验室必须满足3个基本需要：实验准备（培养基制备、器皿洗涤、培养基和培养器皿灭菌）、无菌操作和控制培养。 此外，还可根据所从事的实验要求来考虑辅助实验室及其各种附加设施，使实验室更加完善。第四页，共六十页。二、实验室构成与配置准备室缓冲室无菌操作室培养室基本实验室实验室组成细胞生物学实验室温 室生化分析实验室辅助实验室第五页，共六十页。（一）基本实验室 基本实验室包括准备室、无菌操作室、培养室、缓冲间，是植物组织培养实验所必须具备的基本条件。如进行工厂化生产，年产4万-20万，需3-4间实验用房，总面积60平方米。 第六页，共六十页。平台灭菌锅水槽培养架药品柜超净工作台无菌室平台工作台平台准备室缓冲间培养室基本实验室示意图第七页，共六十页。1、准备室 功能：进行一切与实验有关的准备工作：器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。 要求：20平方米左右。要求宽敞明亮、以便于放置多个实验台和相关设备，方便多人同时工作；同时要求通风条件好，便于气体交换；实验室地面应便于清洁，并应进行防滑处理。 设备：准备室应具备工作台、柜橱、水池、仪器、药品等。 第八页，共六十页。第九页，共六十页。分类：分体式-研究性质实验室，可将准备室分解为药品贮藏室、培养基配制与洗涤室和灭菌室等，功能明确，便于管理，不适于大规模生产。通间式-规模化实验室，设计成大的通间，试验操作的各个环节在同一房间内按程序完成。便于程序化操作与管理，减少各环节间的衔接时间，提高工作效率。还便于培养基配制、分装和灭菌的自动化操作程序设计，减少规模化生产的人工劳动，更便于无菌条件的控制和标准化操作体系的建立。第十页，共六十页。2、无菌操作室 功能：也叫接种室，进行材料的离体无菌操作，是植物离体培养研究或生产中最关键的一步。 要求：房间一般不宜过大，10-20平方米即可。要求封闭性好，干燥清洁，能较长时间保持无菌，因此不宜设在容易受潮的地方；为便于消毒处理，地面及内墙壁都应采用防水和耐腐蚀材料；地面要求平坦无缝，便于清洁；为了保持清洁，无菌室应防止空气对流。 第十一页，共六十页。无菌室第十二页，共六十页。第十三页，共六十页。 一般新建实验室的无菌室在使用之前应进行灭菌处理，处理方法是甲醛和高锰酸钾熏蒸，并需定期灭菌处理，还可用紫外线照射1-2h/周，或每次使用前照射10-30min。 设备：无菌操作室安装有紫外灯和空调，工作台和搁架，还有超净工作台和整套灭菌接种仪器、药品等。第十四页，共六十页。3、培养室 功能：对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养，实验材料进行培养的场所。 要求：10-20平方米左右。要求能够控制光照和温度，并保持相对的无菌环境。因此，培养室应保持清洁和适度干燥；为满足植物培养材料生长对气体的需要，还应安装排风窗和换气扇等换气装置；为节省能源和空间，应配置适宜的培养架，并应安装日光灯照明。 第十五页，共六十页。第十六页，共六十页。第十七页，共六十页。 研究用实验室，通常可根据光照时间设置成长日照、中日照、短日照培养室，也可以根据温度设置成高温和低温培养室，每一个培养室的空间不宜过大，便于对条件的均匀控制。进行精细培养类型如细胞培养和原生质体培养，可采用光照培养箱或人工气候箱代替培养室。 设备：培养架、光照培养箱或人工气候箱、边台用于拍摄培养物生长状况，除湿机、显微镜、温湿度计、空调等。 第十八页，共六十页。4、缓冲间 功能：进入无菌室前的缓冲场地，减少人体从外界带入的尘埃等污染物。人员在此换上工作服、拖鞋、口罩，才能进入无菌室和培养室。 要求：3-5平方米，在准备室外或无菌操作室外，应保持清洁无菌；备有鞋架和衣帽挂钩。 设备：1-2盏紫外灯对衣物进行灭菌、灭菌工作服、拖鞋、口罩。第十九页，共六十页。第二十页，共六十页。（二）辅助实验室 根据研究或生产的需要而配套设置的专门实验室，主要用于细胞学观察和生理生化分析等。第二十一页，共六十页。1、细胞学实验室 功能：对培养材料进行细胞学鉴定和研究，