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- 2021-10-29 发布于湖南
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仪器分析 -- 层析技术二、层析法实验技术
(一)凝胶层析法
凝胶层析又称分子筛过滤、排阻层析等。它的突出优点是层析所用的凝胶属于惰性
载体,不带电荷,吸附力弱,操作条件比较温和,可在相当广的温度范围下进行,不需要有
机溶剂,并且对分离成分理化性质的保持有独到之处。对于高分子物质有很好的分离效果。
⒈凝胶的选择根据实验目的不同选择不同型号的凝胶。如果实验目的是将样品中的
大分子物质和小分子物质分开, 由于它们在分配系数上有显著差异, 这种分离又称组别分离,
一般可选用 SephadexG-25 和 G-50,对于小肽和低分子量的物质( 1000-5000 )的脱盐可使用
SephadexG-10 ,G-15 及 Bio-Gel-p-2 或 4. 如果实验目的是将样品中一些分子量比较近似的物
质进行分离,这种分离又叫分级分离。一般选用排阻限度略大于样品中分子量物质的凝胶,
层析过程中这些物质都能不同程度地深入到凝胶内部,由于 Kd 不同,最后得到分离。
⒉柱的直径与长度根据经验, 组别分离时, 大多采用
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