《奥赛微生物学讲》课件.ppt

完整版课件ppt 杀死细胞芽孢最有效的方法是（ ） A、煮沸 B、间歇灭菌 C、紫外线照射 D、高压蒸汽灭菌 D 紫外线杀菌的原理是（ ） A、使蛋白质变性 B、DNA结构改变 C、破坏酶系统 D、干扰蛋白质合成 菌种保藏的最佳方法是( ) A、干燥冷冻保藏 B、冷冻保藏 C、冷冻真空干燥保藏 D、液氮下贮藏 B C 微生物的遗传变异 几个概念： （1） 遗传型又称基因型 它是指某一生物个体所含有的全部遗传因子的总和。遗传物质起决定性作用，而外界环境可以影响其表型，即： 遗传型+环境条件=表型 （2）表型：指肉眼可以观察到的某一生物所有具有的一切外部特征。 （3）变异：指生物体在内因或外因的作用下引起的遗传物质的改变。 遗传变异的物质基础 三个经典试验 （一） 转化实验： 1928年英国的细菌学家格里菲斯（Griffith）首先发现肺炎球菌的转化现象。肺炎球菌是一种病原菌，存在两种类型：光滑型（S）和粗糙型（R）S型有荚膜，菌落光滑，能使人和动物得病死亡。R型无荚膜，粗糙，不能使人和动物得病。 实验说明，加热杀死的S型细菌，在其细胞内可能存在一种转化物质，它能通过某种方式进入R型细胞，并使R型细胞获得稳定的遗传性状。 离体条件下进行了转化实验： （1）??????????????? （1）从活的S菌中抽提各种细胞成分（DNA、蛋白质、荚膜多糖等） （2） 对各组分进行转化试验。 从上述结果中可知，只有S型细菌的DNA才能将S的R型转化为S型，而且DNA纯度越高，转化效率也越高，直到只取用纯度为6×10-6g的DNA时，仍有转化能力，这就说明，S型菌株转移给R型菌株时，决不是某一遗传性状（在这里是荚膜多糖）的本身，而是以DNA为物质基础的遗传因子。 转化的条件： （1）转化的DNA片段的分子量要小于1×107，最多不超过10~20个基因。 （2）受体菌只有进入感受态时才能摄取外源DNA。 感受态的细菌： ①表面有一种吸附DNA的受体； ②感受态细菌一般出现在对数生长期 的后期（维持几分钟至3~4h）。 细菌的感受态可用人工诱导的转化程序形成。人工感受态的转化系统最适用于质粒和噬菌体的DNA。 影响转化的因素 （1）转化DNA分子量在1X10—7以下；（2）亲缘关系越近，转化率越高；（3）DNA纯度越高，转化率越高。 （二） 噬菌体感染实验： 首先将Ecoli分别培养在放射性32PO43-或 35SO42-作为P或S源的培养基中，结果35S 存在于蛋白质，而32P只存在于核酸，然后让T2噬菌体侵染，从而使T2被标记上S和P，接着让具放射性的T2感染不含放射性元素的大肠杆菌，并在噬菌体复制前进行搅动并离心，得上清液和沉淀物，结果发现S位于上清液而P位于底部，这说明蛋白质外壳没有进入Ecoli，由于搅动而脱落，且较轻，故位于上部，而DNA进入菌体，且较重，被沉淀下来。对沉淀液进行培养发现有大量完整的T2噬菌体出现，因此证实了DNA是遗传信息的载体。 （三） 植物病毒的重建实验： 1965年美国学者法朗克.康勒特（H、Fraenrel—Conrat）用含RNA的烟草花叶病毒进行了植物病毒重建实验。他将TMV（烟草花叶病毒）放在一定浓度的苯酚溶液中振荡，将它的蛋白质外壳与RNA核心分离，RNA在没有蛋白质包裹的情况下，也能感染烟草，且能分离出正常的病毒离子，证明RNA是遗传物质，另外，他还选用了另一株与TMV近似的霍氏车前花叶病毒（HRV）进行实验。 从图中可以看出，用TMV的RNA和HRV的蛋白质外壳重建的杂合病毒去感染烟草时，烟叶上出现的是典型的TMV病斑。再从分离出来的新病毒中分析发现，它是未带有任何HRV痕迹的典型TMV病毒，反之亦然。这充分地证明了核酸决定蛋白质，是遗传物质。 基因突变 一、??? 基因突变： 简称突变，是指生物体内遗传物质的分子结构突然发生的可遗传的变化。突变机率一般在10-6~10-9。 （一） 突变类型： 突变的类型很多，我们按突变后极少数变株的表型是否能在选择培养基上加以鉴别区分，分为选择性突变株。凡能用选择性培养快速选择出来的突变株。反之称为非选择性突变株。 选择性突变株有：营养缺陷型、抗性突变型、条件致死突变型。 非选择性突变株有：形态突变型、抗原突变型和产量突变型。 （1）营养缺陷型：某野生型菌株由于发生基因突变而丧失合成一种或几种生长因子的能力。因而无法在基本培养基上正常生长繁殖的变异类型，加上某生长因子可生长。 （2）抗性突变型： 由于基