新型冠状病毒DNA实时荧光环介导等温扩增试剂盒及其检测方法发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112575121 A (43)申请公布日 2021.03.30 (21)申请号 202011540939.9 (22)申请日 2020.12.23 (71)申请人 漳州海关综合技术服务中心 地址 363000 福建省漳州市龙文区水仙大 街石仓路段（与六号路交叉处）检验检 疫综合实验楼 (72)发明人 周赞虎　何王福　徐敦明　张鸣青　 庄燕煌　何艺贞　陈春香　林子旭　 (74)专利代理机构 厦门市精诚新创知识产权代 理有限公司 35218 代理人 徐铭煌 (51)Int.Cl. C12Q 1/70 (2006.01) C12Q 1/6844 (2018.01) C12R 1/93 (2006.01) 权利要求书2页 说明书4页 序列表2页 附图1页 (54)发明名称 新型冠状病毒DNA实时荧光环介导等温扩增 试剂盒及其检测方法 (57)摘要 本发明涉及生物检测试剂及其检测方法，具 体涉及新型冠状病毒DNA实时荧光环介导等温扩 增试剂盒及其检测方法；本发明根据世界卫生组 织公布的新型冠状病毒的检测特异序列ORF1ab 为靶基因，根据该靶基因的反转录后的DNA序列， 设计了2套新型冠状病毒LAMP检测的特异性引物 和环介导等温扩增反应体系，任何一套引物均能 在该反应体系里快速扩增检测新型冠状病毒，该 试剂盒检测新型冠状病毒DNA具有高特异性和高 灵敏度，低成本、快速且操作简便等特点。 A 1 2 1 5 7 5 2 1 1 N C CN 112575121 A 权　利　要　求　书 1/2 页 1.一种新型冠状病毒DNA实时荧光环介导等温扩增试剂盒，其特征在于，包括以下物 品：a.引物组；b.DNA聚合酶；c.LAMP反应液；d.阳性对照物和阴性对照物；e.荧光染料。 2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒DNA实时荧光环介导等温扩增试剂盒，其特征在 于，所述引物组包括两套引物组，每套引物组均包含一对外引物即F3和B3、一对内引物即 FIP和BIP和一对环引物即LoopF和LoopB，其核苷酸序列分别如下所示： 第一套引物组： F3:GTTGCCACATAGATCATCCA B3:ACATCAGTACTAGTGCCTGT FIP：GCCATAACCTTTCCACATACCGAACTTGTGCTAATGACCCTG BIP：GCGAACCCATGCTTCAGTCATAAGACGGGCTGCACTTA LoopF:CAGACGGTACAGACTGTGTT LoopB:TTTAAACGGGTTTGCGGTG 第二套引物组： F3:AAGCCTCTTCTCGTTCCT B3:CTCAGCAGCAGATTTCTTAGT FIP：AGCAGCATCACCGCCATTAATTCAACTCCAGGCAGC BIP：GCTTTGCTGCTGCTTGACAGTTGTTGGCCTTTACCAGAC LoopF:CCAGCCATTCTAGCAGGAG LoopB:ATTGAACCAGCTTGAGAGCA 检测试剂盒包含以上两套引物组中的其中一套，以上两套引物组任选一套均可。 3.根据权利要求1所述的新型冠状病毒DNA实时荧光环介导等温扩增试剂盒，其特征在 于：外引物、内引物、环引物的摩尔比为：1:8:4