利用HEK293细胞制备新型冠状病毒核衣壳蛋白的方法.pdfVIP

利用HEK293细胞制备新型冠状病毒核衣壳蛋白的方法.pdf

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(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 CN 112410374 B (45)授权公告日 2021.04.23 (21)申请号 202110093396.9 G01N 33/58 (2006.01) A61K 39/215 (2006.01) (22)申请日 2021.01.25 A61P 31/14 (2006.01) (65)同一申请的已公布的文献号 (56)对比文件 申请公布号 CN 112410374 A CN 111537748 A,2020.08.14 (43)申请公布日 2021.02.26 Wu F 等.“YP_009724397.2”《GenBan. k》 (73)专利权人 北京百普赛斯生物科技股份有限 .2020, 公司 Schmidt D 等.“AHG24896.1”《GenBan. k》 地址 100176 北京市大兴区经济技术开发 .2014, 区宏达北路8号4幢4层 北京同立海源生物科技有限公司.“真核表 达新冠病毒蛋白经验证比原核蛋白大幅降低假 (72)发明人 秦丽丽 王晓菲 张林 张晓慧  阳性率”《生物在线w. 》.2020, (74)专利代理机构 北京路浩知识产权代理有限 北京同立海源生物科技有限公司.“真核表 公司 11002 达新冠病毒蛋白经验证比原核蛋白大幅降低假 代理人 黄爽 阳性率”《生物在线w. 》.2020, (51)Int.Cl. 审查员 蔺娜 C12N 15/85 (2006.01) C07K 14/165 (2006.01) 权利要求书1页 说明书6页 G01N 33/569 (2006.01) 序列表5页 附图3页 (54)发明名称 利用HEK293细胞制备新型冠状病毒核衣壳 蛋白的方法 (57)摘要 本发明提供一种利用HEK293细胞制备新型 冠状病毒核衣壳蛋白的方法,包括:1)构建新冠 病毒核衣壳蛋白(N蛋白)重组表达载体;2)用重 组表达载体转染HEK293细胞;3)体外培养细胞, 从培养上清中分离纯化N蛋白。利用HEK293表达 系统可在短时间内获得大量新冠病毒N蛋白,通 过一步亲和层析法可获得纯度高达98%以上的N 蛋白。与大肠杆菌相比,采用HEK293表达系统制 备的N蛋白在与抗体的结合活性及新冠抗体胶体 金检测方面均表现出极大优势,且HEK293表达系 B 4 统制备的N蛋白其蛋白空间构象接近于病毒N

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