蛋白质等电点测定.docxVIP

蛋白质等电点测定及性质实验 一、 目的： 了解等电点的意义及其与蛋白质分子聚沉能力的关系。 初步学会测定蛋白质等电点的基本方法，了解蛋白质的性质。 二、 原理： 固体颗粒在液体中为什么能够带电 当固体与液体接触时，固体可以从溶液中选择性吸附某种离子，也可以是固体分子本 身发生电离作用而使离子进入溶液，以致使固液两相分别带有不同符号的电荷，由于电中性 的要求，带电表而附近的液体中必有与固体表而电荷数量相等但符号相反的多余的反离子。 在界面上带电表而和反离子形成了双电层的结构。在两种不同物质的界面上，正负电荷分 别排列成的面层。 对于双电层的具体结构，一百多年来不同学者提出了不同的看法。最早于1879年 Helmholz提出平板型模型；1910年Gouy和191.3年Chapman修正了平板型模型，提出了扩 散双电层模型：后来Stern又提出了 Stern模型。 根据0.斯特恩的观点，一部分反离子由于电性吸引或非电性的特性吸引作用（例如范 德华力）而和表面紧密结合，构成吸附层（或称紧密层、斯特恩层）。其余的离子则扩散地 分布在溶液中，构成双电层的扩散层（或称滑移而）。由于带电表面的吸引作用，在扩散层 中反离子的浓度远大于同号离子。离表面越远，过剩的反离子越少，直至在溶液内部反离子 的浓度与同号离子相等。  紧密层：溶液中反离子及溶剂分子受到足够大的静电力，范德华力或特性吸附力，而紧