2019-nCoV S基因检测核酸组合物及试剂盒与生产方法发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 111363858 A (43)申请公布日 2020.07.03 (21)申请号 202010452859.1 (22)申请日 2020.05.26 (71)申请人 南京黎明生物制品有限公司 地址 210042 江苏省南京市玄武区蒋王庙 116-1号 (72)发明人 张树文　葛斌文　 (51)Int.Cl. C12Q 1/70(2006.01) C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12R 1/93(2006.01) 权利要求书2页 说明书10页 序列表3页 附图2页 (54)发明名称 新型冠状病毒S基因检测核酸组合物及试剂 盒与生产方法 (57)摘要 本发明公开了一种新型冠状病毒S基因检测 核酸组合物及试剂盒与生产方法，涉及病毒体外 核酸检测技术领域。新型冠状病毒S基因检测核 酸组合物为正向引物、反向引物及探针；检测试 剂盒中包含上述核酸组合物，还包括酶混合物和 PCR MIX，该检测试剂盒可制备成液态，也可制备 成粉态；本发明中粉态的检测试剂盒的生产方法 包括混合和冻干步骤。本发明中的核酸组合物及 试剂盒可对新型冠状病毒特异性的保守基因S基 因上的目标基因进行扩增，且检测灵敏度高，还 能对病毒的初始拷贝数进行定量，可广泛用于新 A 型冠状病毒核酸检测。 8 5 8 3 6 3 1 1 1 N C CN 111363858 A 权　利　要　求　书 1/2 页 1.一种新型冠状病毒S基因检测核酸组合物，所述核酸组合物包括正向引物、反向引物 和探针，其特征在于，所述正向引物的序列如SEQ  ID NO.1所示； 所述反向引物的序列如SEQ  ID NO.2所示； 所述探针的序列如SEQ  ID NO.3所示； 所述探针的5’端采用荧光报告基团修饰，所述探针的3’端采用荧光淬灭基团修饰。 2.一种新型冠状病毒S基因检测试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述的正向引 物、反向引物和探针，且所述正向引物、反向引物和探针独立包装，还包括酶混合物和PCR  MIX。 3.根据权利要求2所述的一种新型冠状病毒S基因检测试剂盒，其特征在于，所述正向 引物、反向引物及探针为液态，所述酶混合物和PCR MIX为液态，所述PCR MIX中包含有PCR 缓冲液、阳离子及dNTPs。 4.根据权利要求2所述的一种新型冠状病毒S基因检测试剂盒，其特征在于，所述酶混 合物和所述PCR MIX均为粉态；检测试剂盒内还包括粉态的冻干保护剂；粉态的核酸组合 物、粉态的酶混合物、粉态的PCR MIX及粉态的冻干保护剂混合后冻干形成冻干粉反应试 剂。 5.根据权利要求3或4所述的一种新型冠状病毒S基因检测试剂盒，其特征在于，所述酶 混合物中包含有RNA酶抑制剂。 6.根据权利要求3或4所述的一种新型冠状病毒S基因检测试剂盒，其特征在于，检测试 剂盒内还包括阳性对照品，所述阳性对照品为含有目标基因序列的假病毒。 7.根据权利要求3或4所述的一种新型冠状病毒S基因检测试剂盒，其特征在于，所述酶 混合物还包括DNA聚合酶和逆转录酶，所述DNA聚合酶选用热启动Taq酶，所述逆转录酶选自 c-MMLV逆转录酶或AMV逆转录酶中的一种。 8.根据权利要求3或4所述的一种新型冠状病毒S基因检测试剂盒，其特征在于，所述