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血液中血红蛋白含量的测定 王耀华 血液中血红蛋白含量的测定lowbar;王耀华 第21卷第3期 化工时刊 Vol.21,No.32021年3月ChemicalIndustryTimesMar.3.2021 血液中血红蛋白含量的测定 (东南大学化学化工学院,江苏南京210096) 摘 要 利用电合成方法在玻碳电极表面制备聚硫堇薄膜,并用电化学及石英电子微天平方法研究其对血红蛋白的吸附作用。吸附态血红蛋白具有直接的电化学行为,且其氧化)还原电流与血红蛋白(Hb)的含量成正比关系,可用于血液中血红蛋白含量的测定。 关键词 电聚合 硫堇 血红蛋白 石英电子微天平 循环伏安 DetectionofHemoglobininHumanBlood WangYaohua (CollegeofChemistryandChemicalEngineering,SoutheastUniversity,JiangsuNanjing210096) Abstract Athinfilmofpolythionineonglassycarbonelectrodewaspreparedbyanelectropolymerizationprocess1Theadsorptionofhemoglobinontheresultingfilmwasinvestigatedbyvoltammetricandmassmeasurements1Theadsorbedhemoglobindisplayeddirectelectrontransferbehaviorandthepeakcurrentwasproportionaltohemoglobinconcentrationsinsolution,whichcouldbeusedfordeterminationofhemoglobininhumanblood1 Keywords electropolymerization thionine hemoglobin quartzcrystalmicrobalance cyclicvoltammetry 我国南京大学陈洪渊教授提出用亚甲蓝萘酚膜修饰碳纤维电极,基于固定化亚甲蓝对血红蛋白的催化氧化,可以在510~50Lmol#L-1 冲溶液中进行,采用循环伏安法,电位区间为-015到+015V,以20mV/s的扫速扫描20圈后,用2次蒸馏水冲洗3次,浸泡在磷酸盐缓冲溶液中备用。石 英电子微天平实验芯片修饰与上述方法相似。 的范围内精确测 量溶液中的血红蛋白[1],本文采用电聚合方法将硫堇沉积在玻碳电极表面,利用聚合物膜对血红蛋白分子的吸附作用实现溶液中血红蛋白含量的定量检测。 血红蛋白在聚硫堇薄膜上的吸附 牛血红蛋白(Hb)、硫堇、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠均购自国药集团化学试剂有限公司,其他试剂均为分析纯。pH值为710的磷酸盐缓冲溶液(PBS)由011mol#L-1NaH2PO4与Na2HPO4混和而成。实验用水均为二次蒸馏水。 电化学及石英电子微天平实验是在Autolab电化学工作站(荷兰)上进行的。电化学实验采用三电极系统,其中包含Ag/AgCl参比电极、铂丝辅助电极和玻碳工作电极。电化学聚合硫堇薄膜在含10mol#L-1硫堇的011mol#L-1pH值710的磷酸盐缓 收稿日期:2021-01-11 作者简介:王耀华(1962~),男,助理工程师,研究方向:电化学 图1 裸玻碳电极与聚硫堇修饰电极在磷酸盐缓冲溶液加入50Lg/mL血红蛋白前(a)和(c)及 加入后(b)和(d)的循环伏安图 化工时刊 20211Vol121,No.3 工艺#试验5TechnologyTesting6 图1是裸电极及聚硫堇修饰电极在缓冲溶液中的循环伏安图。从图1可看出裸电极在缓冲溶液中加血红蛋白前后循环伏安图没有明显的变化,只是从0105V开始出现明显增加的还原电流,该还原电流的增加可能是由于加入的血红蛋白分子在电极上的不可逆还原所致。与此同时,聚硫堇电极在缓冲溶液中出现一对很宽的氧化还原峰,对应于硫堇聚合后其杂环氮原子的电化学活性。当在此缓冲溶液中加入血红蛋白,前面的宽峰保持不变,在-36和-74mV处出现一对新的氧化还原峰,且该氧化还原峰的峰电流随溶液中血红蛋白量的增加而增大,因此该氧化还原峰可能是由于血红蛋白分子在聚硫堇薄膜表面发生吸附作用,吸附态血红蛋白分子在电极上发生电子传递反应使峰电流增加。血红蛋白的等电点为617,在pH值为710的缓冲溶液中是负电性的,而硫堇聚合物是正离子型聚合物,因此可通过静电吸