一种用于新型冠状病毒检测的酶标记的抗原、制备方法及试剂盒与应用发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 111474340 A (43)申请公布日 2020.07.31 (21)申请号 202010416930.0 G01N 33/551(2006.01) G01N 33/569(2006.01) (22)申请日 2020.05.18 G01N 21/76(2006.01) (71)申请人 博奥赛斯（天津）生物科技有限公司 地址 300300 天津市东丽区东丽开发区六 经路国际医疗器械产业园14号楼 申请人 重庆医科大学 (72)发明人 刘萍　黄爱龙　栾大伟　张振斌　 杨桂霞　宋德才　何景珍　左松涛　 寇悦　王程飞　刘汉昆　汪德强　 陈娟　 (74)专利代理机构 天津企兴智财知识产权代理 有限公司 12226 代理人 王雨杰 (51)Int.Cl. G01N 33/535(2006.01) 权利要求书2页 说明书44页 序列表8页 附图4页 (54)发明名称 一种用于新型冠状病毒检测的酶标记的抗 原、制备方法及试剂盒与应用 (57)摘要 本发明创造提供了一种用于新型冠状病毒 检测的酶标记的抗原、制备方法及试剂盒与应 用，采用高碘酸钠氧化法将2019-nCoV抗原与酶 进行偶联得到。本发明创造所述的试剂盒与现有 核酸检测试剂盒相比具有操作简便，速度快，成 本低，对实验室要求低等特点。 A 0 4 3 4 7 4 1 1 1 N C CN 111474340 A 权　利　要　求　书 1/2 页 1.一种酶标记的2019-nCoV抗原，其特征在于：采用高碘酸钠氧化法将2019-nCoV抗原 与酶进行偶联得到，所述的酶为碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶，所述2019-nCoV抗原包括氨 基酸序列为SEQ  ID NO：1至SEQ  ID NO：4所示的4种合成多肽，所述2019-nCoV抗原中的4种 合成多肽的质量比为1：1：1：1。 2.一种制备权利要求1所述的酶标记的2019-nCoV抗原的方法，其特征在于：包括如下 步骤： 步骤A、酶活化； a1、配制5-10mg/mL酶溶液； a2、配制10-20mg/mL过碘酸钠溶液； a3、将上述a1和a2配制溶液按体积比1：（1-3）混匀，室温避光反应0.5-2h； a4、配置浓度为10-40μL/mL的乙二醇水溶液，与步骤a3配制溶液以1：（1-2）的体积混 合，常温避光反应0.5-2h，活化即完成； 步骤B、酶标记2019-nCoV 抗原： b1、将2019-nCoV抗原装入透析袋中，用0.02-0.1M pH9.6的碳酸盐缓冲液，透析0.5- 2h，当2019-nCoV抗原为合成多肽时，省略该步骤； b2、将透析后的2019-nCoV抗原与步骤A活化的酶按质量比1:（2-4）进行混合，之后用 0.02-0.1M碳酸盐缓冲液于2-8℃透析20-24h，期间换液2-3次； 当2019-nCoV抗原为合成多肽时，将合成多肽与步骤A活化的酶按摩尔比1:（1-3）进行 混合，避光37℃反应8-12h；