胞内游离Ca的测定方法.pdfVIP

Pluronic F-127 (F127) 美国 Molecular Probes Inc. 产品。 Ultima 型共聚焦激光扫描显微镜为美国 MERIDIAN Instruments Inc 产品。 1. 光源： Ultima 型 50Mw UV,200Mw Visible 2. 激发波长： 351-364nm ，488nm ，514nm 3. 扫描系统： Ultima 为台阶扫描，精度 0.1um 目的：监测细胞胞浆中游离钙的动态变化 原理：正常细胞内游离钙浓度 [Ca2 ┼ ]i 为 0.1 umol/L, 胞外钙离子浓度为 1.2-1.3mmol/L, 相差达 10000 倍。胞外钙内流和胞内钙库动员形成的钙震荡 (钙 峰或钙波 )在各种生理过程中起重要作用；病理状态下细胞内钙超负荷将造成一 系列代谢紊乱 ,直至细胞坏死或凋亡；钙离子通道阻断剂已广泛应用于临床。显 而易见 ,测定 [Ca2┼]i 在生理学、病理学和药理学等研究工作中均具有重要意义。 Fluo-3/AM 等钙离子荧光染料以脂溶性的乙酰甲氧基酯（ AM 酯）的形式导