分子诊断在乙肝诊疗中应用优秀课件.ppt

目 录 乙肝检测指标作疗效预测的意义 乙肝检测指标作治疗终点的意义 各国指南对乙肝治疗终点和目标的描述 第二十九页，共38页 乙肝检测指标在诊疗中的应用 高灵敏度HBV DNA定量 （内标法） 感染早期判断 病情监测 药物疗效判断 用药方案指导 停药判断 HBV基因分型 病情预后发展评估 抗病毒药物疗效判断 cccDNA检测 确定病毒清除 判断停药时间 判断肝外组织感染 乙肝耐药全基因测序 （测序法） 抗药监测 治疗药物选择 HBsAg定量检测 （全定量） 乙肝两对半定量检测 疗效预测 疗效检测 乙肝检测指标作治疗终点的意义 第三十页，共38页 高灵敏HBV-DNA定量在临床中的应用 开始治疗 治疗12周 治疗24周 基于HBV DNA、ALT水平和疾病发展阶段 是否存在原发性无应答 （HBV DNA较基线降低不到1 log10） 完全病毒学应答 60 IU/ml 继续治疗 每6个月监测HBV DNA 部分病毒学应答 60-2000 IU/ml 加其他药物治疗 每3个月监测HBV DNA 不充分病毒学应答 2000 IU/ml 改用或加用更强药物 每3个月监测HBV DNA 治疗终点 达到持续的病毒学抑制 （用最灵敏方法检测不到HBV-DNA ） 第三十一页，共38页 常规定量PCR检测下限偏高，无法准确评价治疗应答情况及判断治疗终点，使得治疗后临床复发率高 HBV DNA （0-20 IU/ml） HBV DNA （500 IU/ml） 更准确检测低浓度病毒 判断治疗终点，避免假阴性 HBV DNA （20-1.7×108 IU/ml） HBV DNA （103-107 IU/ml） 线性范围更宽，可以更准确地检测低浓度与高浓度的HBV DNA 高灵敏度定量 常规定量PCR 优势 检出限 线性范围 目前监测HBV-DNA中存在的问题 第三十二页，共38页 “HBV DNA定量检测需要高灵敏度方法 （最低值为20 IU/ml以下）” “一个能够侦测10-15 IU/ml 的real-time PCR方法是最好的疾病监测的工具” 2011 EASL指南 －－要进行高敏感度HBV DNA定量检测 第三十三页，共38页 COBAS HBV 430例血浆 Real time PCR HBV1000 copies/mL 222例（51.6%） 20 IU/mL 208/430(48.4%) 20 IU/mL 2.0 test 经COBAS TaqMan HBV 检测后，共有158/430（36.7%）病毒载量 1000 copies/mL Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan HBV病毒载量系统对慢性乙型肝炎抗病毒治疗监测的意义 李敏伟 沃健儿 倪淑君 王 静 李兰娟 浙江大学附属第一医院传染病诊治国家重点实验室Data on file 普通乙肝病毒定量检测假阴性率高达36.7% 64/222（28.38%）E+02 copies/mL 107/222（48.20%）E+03 copies/mL 35/222（15.77%）E+04 copies/mL 7/222（3.15%）E+05 copies/mL 2/222（0.9%）E+07 copies/mL 7/222（3.15%）E+06 copies/mL 第三十四页，共38页 华西医院采用COBAS TaqMan HBV检测20例治疗48周普通PCR报告HBV DNA1000 copies/ml样本的结果分析 20例患者组成特点 --9例服用ETV、11例服用ADV（48周） --10例eAg阳性、8例eAg阴性患者、 2例1,5阳患者 检测试剂 病例数 HBV DNA分布范围 国产HBV 20例 1000 copies/ml CAP/CTM HBV 11例 8例* 1例 Target Not Detected 103~104 copies/ml 104~105 copies/ml *包括1例服用ETV患者 普通PCR法 “假阴性”率高达45% (9/20) 高灵敏度HBV-DNA定量 帮助临床医生更准确监测疗效及判断治疗终点 第三十五页，共38页 高灵敏度HBV-DNA定量检测是国内唯一满足治疗指南和专家共识的HBV-DNA检测项目 高灵敏度HBV-DNA定量 检测下限：0—20 IU/ml COBAS?AmpliPrep/COBAS?TaqMan 分析仪 2007年美国新修订的《慢性乙型肝炎病毒感染处理治疗规范》,推荐优先选用COBAS?TaqmanHBV DNA分析系统作为乙肝病毒学检测的方法。 第三十六页，共38页 总 结 用HBeAg和HBsAg定量或血清