【人教版】生物20版《高中全程学习方略》选修三1.2.ppt

答案:(1)DNA双链复制 (2)BamHⅠ和Sau3AⅠ　两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端 (3)启动子和终止子　转录 (4)不能　含质粒的农杆菌和含重组质粒的农杆菌均含有抗四环素基因,在含四环素的培养基上均能生长 【跟踪小练】 1.下列关于基因文库的说法中,不正确的是 (　　) A.某果蝇X染色体上的所有基因组成的文库是部分基因文库 B.cDNA文库中的基因可以在不同物种间进行交流 C.取出果蝇某细胞中全部mRNA,通过反转录产生的全部DNA片段称为该果蝇的基因组文库 D.从cDNA文库中获取的目的基因,既无启动子,又无终止子 【解析】选C。某果蝇X染色体上的所有基因组成的文库是部分基因文库,A项正确;cDNA文库中的基因可以在不同物种间进行交流,B项正确;取出果蝇某细胞中全部mRNA,通过反转录产生的全部DNA片段称为部分基因文库,C项错误。cDNA文库是用mRNA反转录得到的DNA,只含有编码对应蛋白质的信息,没有控制该基因表达的相关元件(启动子、终止子),也没有内含子,因此从cDNA文库中获取的目的基因没有启动子和终止子,D项正确。 2.(2018·全国卷Ⅱ节选)某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP基因的5′末端,获得了L1-GFP融合基因(简称为甲),并将其插入质粒P0,构建了真核表达载体P1,其部分结构和酶切位点的示意图如下,图中E1～E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。 回答下列问题: (1)据图推断,该团队在将甲插入质粒P0时,使用了两种限制酶,这两种酶是 　　　　　　　。使用这两种酶进行酶切是为? 了保证　　　　　　,也是为了保证　　　　　　　　　。? (2)将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明 L1基因在牛的皮肤细胞中完成了　　　　　　　和　　　　　　　　过程。? (3)为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进行鉴 定,在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的　　　　　　(填“mRNA”“总 RNA”或“核DNA”)作为PCR模板。? 【解析】(1)将甲插入质粒P0时,为了保证甲(L1-GFP融合基因)的完整性,应该选择E1和E4两种酶切割,并且把目的基因插入启动子和终止子之间,从而使其能在受体细胞中表达。 (2)在牛皮肤细胞中观察到了绿色荧光表明基因已表达,而基因的表达包括转录和翻译两个过程。 (3)检测甲是否存在于牛的不同组织细胞中,可以采用PCR技术扩增,再用DNA分子杂交技术来检测,PCR技术中模板是DNA,并不是RNA。 答案:(1)E1和E4　甲的完整　甲与载体正确连接 (2)转录　翻译 (3)核DNA 二、目的基因导入受体细胞及检测与鉴定 1.农杆菌转化法分析: (1)构建携带目的基因的表达载体,需要两种工具酶:限制酶和DNA连接酶。 (2)基因表达载体(重组质粒)导入农杆菌细胞时,要用Ca2+处理农杆菌细胞,使其处于感受态,利于重组质粒的导入。 (3)由导入目的基因的受体细胞培育到完整的植株要用到植物组织培养技术。 2.目的基因的检测与鉴定的方法比较: 易错提醒: 关于不同分子检测的原理、场所、探针的异同 (1)原理:转录水平的检测原理与复制水平的检测原理是相似的,只是被检测的物质不再是转基因生物的基因组DNA,而是mRNA;翻译水平的检测,则是利用抗原与抗体特异性结合的原理。 (2)场所:不论是复制水平、转录水平还是翻译水平的检测,都是在体外进行的。 (3)探针:在DNA分子、mRNA分子水平上检测目的基因是否插入、目的基因是否转录时,用的探针都是放射性同位素等标记的含有目的基因的DNA片段。 【选修对接必修】对接必修2　基因的表达 在2020年新型冠状病毒肆虐全球时，针对该病毒的核酸检测试剂盒发挥了重要作用。已知试剂盒中有：逆转录酶试剂、病毒核酸标准试剂、Taq酶、游离的脱氧核糖核苷酸、引物、特异性的荧光探针、缓冲试剂等。请根据此信息回答下列问题： （1）检测过程中为什么需要逆转录酶？ 提示：新型冠状病毒的遗传物质是RNA，而检测时用的探针为荧光标记的DNA片段，需要以RNA为模板通过逆转录合成DNA，因此需要逆转录酶。 必备知识·自主学习 关键能力·合作学习 高中全程学习方略 1.2　基因工程的基本操作程序 一、目的基因的获取 1.目的基因: (1)主要指___________的基因。 (2)也可以是具有_________的因子。 必备知识·自主学习 编码蛋白质 调控作用 2.获取目的基因的三种常用方法: (1)从基因文库中获取。 ①基因文库的含义:将含有_________不同基因的许多________