采用微量热差示扫描量热技术对治疗性抗体工艺开发进行更.pdfVIP

大 分 子 应 用 专 TM 应用指南 28-9870-45 AA MicroCal 题 非标记相互作用分析 采用微量热差示扫描量热技术对治疗性抗体的工艺开发 进行更有效的指导 测定 pH值和离子浓度对蛋白质稳定性的影响，对于开 IgE对于宿主预防寄生虫和防御性炎症来说是很重要的。 发的可靠的蛋白质提纯步骤和制剂配方策略来说具有重 然而 IgE通过其受体转导信号也是过敏性炎症的一个焦点 要的意义。毛细管微量热差示扫描量热法（毛细管 DSC） （4 ）。 IgE的恒定区是一个包含三个 独特 Ig折叠区域 非常适合于提供此类信息，在开发治疗性蛋白质方面具 （C ε2、C ε3、C ε4 ）重复对的同型二聚体，负责绑定其 有特别的实用价值。在此讲述的是对用作药物的两种抗 两个受体即 Fc εRI和CD23 （又称Fc εRII），见图 1。 1 体形式（ IgG 和 IgE）的 pH值/ 离子浓度稳定性的信息采 用用微量热差示扫描量热法（ DSC）所做的研究。微量 本应用指南主要关注微量热差示扫描量热法（ DSC）的 热差示扫描量热法（ DSC）擅长考察、研究与多结构域 实用性，用以多方面指导 IgG和 IgE的生物制剂开发过程。 蛋白质中不同的单结构域的稳定性，例如抗体。在此可 尤其是差示扫描量热法（ DSC）对于运输、纯化和配制 以看到， IgE恒定的结构域片段（ Fc）对低酸碱度 / 高盐 IgG及制剂药品提供了颇有见地的指导。圆二色光谱 1 分的环境比 IgG Fc更为敏感。这些结果表明，用于 IgG （CD）对于此类研究发现的贡献与微量热采用差示扫 抗体的纯化和制剂策略不适用于 IgE的纯化和制剂。该应 描量热法（ DSC）所能达到的鉴别水平上的比较：微量 用指南显示了微量热差示扫描量热法（ DSC）是如何用 热差示扫描量热法（ DSC）能够在多结构域蛋白质内的 于指导抗体及其他治疗用蛋白质的开发研究的。 单结构域水平上研究蛋白质的稳定性，而这方面圆二色 谱获得的数据透明度较低。 导言 γ同种型免疫球蛋白——特别是人源 IgG1——的生产和 纯化，对于诊断或治疗的应用来说目前已经常规化了。 另一方面，基于 IgE 的疗法最近才刚刚开始兴起（ 1-3 ）， 尚未确定大规模生产、处理和配制 IgE 或 IgE 恒定区（ Fc ε） 的标准方法。虽然对于 IgE 的生物化学和免疫调节功能 已有较多掌握，但仍未弄清 Fc ε在耐热性或 pH敏感度 （2 ）方面是否与 Fc γ相似，也未弄清处理 IgG的标准方法 是否适用于 IgE 。 图1. IgG 和IgE 的示意图。 大