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- 2021-11-07 发布于山西
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端粒序列的荧光原位杂交定位 ;实验目的;实验原理;第一,保证染色体不被核酸酶降解;第二,防止染色体相互融合;第三,为端粒酶提供底物,解决DNA复制的末端缩短,保证染色体的完全复制。第四,端粒又是基因调控的特殊位点,可抑制位于端粒附近基因的转录活性。
;端粒的保护与丢失;端粒与着丝粒和复制启始点被称为染色体保持完整和稳定的三大要素。端粒或合成端粒DNA的酶(端粒酶, telomerase)功能异常与机体衰老和癌症密切相关。因在端粒及端粒酶研究方面的杰出贡献,该项成果获得2009年诺贝尔生理学或医学奖。
;荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH) ;20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,FISH的基本原理是将DNA(或RNA)探针用特殊的核苷酸分子标记,然后将探针直接杂交到染色体上,再用与荧光素分子偶联的单克隆抗体与探针分子特异性结合来检测DNA序列在染色体或DNA纤维切片上的定性、定位、相对定量。该技术在特定基因或DNA序列的染色体物理定位,染色体异常相关遗传病检测、物种起源进化分析等多方面具有重要应用,是沟通分子生物学研究与细胞遗传学研究的桥梁。
;25S rDNA和5S rDNA在落叶松中期染色体上的双色FISH定位;实验用品;实验材料;试剂;探针;器
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