2019高考生物二轮复习专题九现代生物科技专题考点1基因工程学案.pdf

（全国通用版） 2019 高考生物二轮复习 专题九 现代生物科技专题 考点 1 基因工程学案 考点 1 基因工程 1．基因工程的 3 种基本工具 （1）限制性核酸内切酶 : 识别特定核苷酸序列，并在特定位点上切割 DNA分子 . (2)DNA 连接酶：① · DNA 连接酶只能连接黏性末端 ; ②T 4 DNA 连接酶能连接黏性末端和 E coli 平末端。 （3) 载体：①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；②有一个至多个限制酶切割位点；③具有 特殊的标记基因 , 以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。 1 （全国通用版） 2019 高考生物二轮复习 专题九 现代生物科技专题 考点 1 基因工程学案 提醒 （1）限制酶≠ DNA酶≠解旋酶 限制酶是切割某种特定的脱氧核苷酸序列，并使两条链在特定的位置断开； DNA酶是将 DNA水 解为基本组成单位；解旋酶是将 DNA的两条链间的氢键打开形成两条单链。 （2) 使用限制酶的注意点： a. 一般用同种限制酶切割载体和目的基因； b. 不同的限制酶也能切 割出相同的黏性末端。 (3)DNA 连接酶≠ DNA聚合酶 DNA连接酶连接两个 DNA片段 , 而 DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上 . 2 ．基因工程的操作流程 （1）目的基因的获取：①从基因文库中获取。②利用 PCR技术扩增 . ③化学方法人工合成。 提醒 ①PCR技术扩增 a ．原理： DNA双链复制 . b ．条件：模板 DNA、引物、游离的脱氧核苷酸、热稳定 DNA聚合酶 . c ．过程 错误 ! ②化学方法人工合成 : 已知核苷酸序列的较小基因 , 直接利用 DNA合成仪用化学方法合成， 不需 要模板 . (2) 基因表达载体的构建——重组质粒的构建 ①基因表达载体的组成 ②构建过程 提醒 ①基因工程中的载体与细胞膜上的载体不同。 ②启动子、终止子 a ．启动子 (DNA 片段）≠起始密码子（位于 mRNA上 ) 。 b ．终止子 (DNA 片段）≠终止密码子 ( 位于 mRNA上） . 2 （全国通用版） 2019 高考生物二轮复习 专题九 现代生物科技专题 考点 1 基因工程学案 ③目的基因插入位置 : 启动子与终止子之间。 (3 ）将目的基因导入受体细胞 根据受体种类确定基因工程的受体细胞及导入方法 . ①植物：植物体细胞或受精卵 - —导入方法常用农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法 ( 本法 针对单子叶植物 ). ②动物 : 受精卵——导入方法为显微注射法。 ③微生物：细菌——导入方法为感受态法。 （4) 目的基因的检测与鉴定的方法 ①检测目的基因是否导入受体细胞： DNA分子杂交技术。 ②检测目的基因是否转录出 mRNA：分子杂交技术 . ③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原—抗体杂交技术。 ④个体生物学水平鉴定：根据表达性状判断。 3 ．蛋白质工程 3 （全国通用版） 2019 高考生物二轮复习 专题九 现代