第七章 紫外-可见分光光度法.ppt

案例导入;第一节 概述;第一节 概述;第一节 概述;第一节 概述;第一节 概述;第一节 概述;第一节 概述;课堂活动 1．紫外-可见光的波长范围是 A．200~400nm B．400~760nm C．200~760nm D．360~800nm 2．下列叙述错误的是 A．光的能量与其波长成反比 B．有色溶液越浓，对光的吸收也越强烈 C．物质对光的吸收有选择性 D．光的能量与其频率成反比;课堂活动 3．紫外-可见分光光度法属于 A．原子发射光谱法 B．原子吸收光谱法 C．分子发射光谱法 D．分子吸收光谱?? 4．分子吸收可见-紫外光后，可发生哪种类型的分子能级跃迁 A．转动能级跃迁 B．振动能级跃迁 C．电子能级跃迁 D．以上都能发生 ;第一节 概述;第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理;朗伯-比尔定律不仅适用于可见光，而且也适用于紫外光和红外光；不仅适用于均匀、无散射的溶液，而且也适用于均匀、无散射的固体和气体。 实验证明：溶液对光的吸光度具有加和性。如果溶液中同时存在两种或两种以上的吸光性物质，则测得的该溶液的吸光度等于溶液中各吸光性物质吸光度的总和，即： A（a+b+c）＝Aa＋Ab＋Ac ;第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理;第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理; 课堂活动 用双硫腙测定Cd2+溶液的吸光度A时，Cd2+（Cd的原子量为112）的浓度为140μg/L，在λ＝525nm波长处，用L＝1cm的吸收池，测得吸光度A＝0.220，试计算摩尔吸光系数和百分吸收系数。 ;课堂互动 某有色溶液的物质的量浓度浓度为c，在一定条件下用1cm比色杯测得吸光度为A，则摩尔吸光系数应为： A．cA B．cM C．A/C D．C/A ;第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理;第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理;第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理; 一、紫外-可见分光光度计的主要部件： 光源—单色器—吸收池—检测器—讯号处理与显示器 ;第三节 紫外-可见分光光度计;第三节 紫外-可见分光光度计;第三节 紫外-可见分光光度计;第三节 紫外-可见分光光度计;第三节 紫外-可见分光光度计; 课堂活动 1.试述紫外-可见分光光度计的主要部件及其作用？ 2.紫外-可见分光光度计有哪些类型？;第三节 紫外-可见分光光度计;一、仪器测量条件的选择 1.应选择最大吸收波长作为入射光。 2.应控制吸光度读数范围： 吸光度在0.2~0.7之间； 透光率在20%~65%之间。 ;第四节 分析条件的选择;第四节 分析条件的选择;第四节 分析条件的选择;一、定性分析方法 定性的基本依据：比较光谱的一致性。 未知物和标准品的吸收光谱曲线，对比二者是否一致。 比较吸收光谱的特征数据及比值的一致性。 二、杂质检查： 将药品光谱与药品标准光谱相对照，利用杂质的特征吸收，可以检测出微量杂质及其含量。 ;案例分析 贝诺酯的定性鉴别 中国药典(2010年版)规定：贝诺酯加无水乙醇制成每1ml约含7.5μg的溶液，在240nm处有最大吸收，相应的百分吸光系数( )应为730～760。 维生素B12也有三个吸收峰，分别在278nm、361nm、550nm波长处，它们的吸光度比值应为：A361nm/A278nm在1.70～1.88之间，A361nm/A550nm在3.15～3.45之间。 ;案例分析 葡萄糖注射液是临床上常用的药品之一。制备时需要高温灭菌，葡萄糖会转化为5-羟甲基糠醛而引入杂质。《中国药典》（2010年版）规定葡萄糖注射液在284nm波长处的吸收度不得过0.32，以此控制其杂质5-羟甲基糠醛的量。 在284nm波长处，葡萄糖无吸收，而杂质5-羟甲基糠醛在此波长处有最大吸收，可以通过控制供试品溶液在此波长处的吸收度来控制杂质的含量。 ;第五节 定性定量方法;第五节 定性定量方法;第五节 定性定量方法;第五节 定性定量方法;第五节 定性定量方法;第五节 定性定量方法;第五节 定性定量方法;第五节 定性定量方法;第五节 定性定量方法;第五节 定性定量方法;第五节 定性定量方法;第五节 定性定量方法;第五节 定性定量方法;3.差示分光光度法 当待测组分含量过高时，吸光度超出了准确测量的读数范围，可以采用差示分光光度法。具体方法是用一个比试样溶液浓度稍低的标准溶液作为参比溶液，将分光光度计调零（透光率100%），测得的