高考生物选修三必记知识点.ppt

;专题一　 基因工程 1.作为载体的条件 ①能在宿主细胞中稳定保存并大量复制。 ②有一个至多个限制性核酸内切酶切割位点，以 便与外源基因连接。 ③具有特殊的标记基因，便于筛选 2.载体的作用 ①作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内； ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 ;3.DNA连接酶有Ecoli DNA连接酶和T4 DNA连接酶两 种，且DNA连接酶起作用时不需要模板。 4.限制酶在使用时的注意事项： ①切割目的基因和载体时，最好用同一种限制酶， 以产生相同的黏性末端。 ②在切割含目的基因的DNA分子时，需用限制酶切 割两次此DNA分子，产生4个末端。只有这样， 目的基因两端都有可连接的黏性末端或平末端。 ③限制酶切割位点应位于标记基因之外，不能破坏 标记基因，以便于进行检测。 5.未知序列的目的基因是无法从基因文库中获取的。;6. PCR技术扩增目的基因的过程： 加热至90～95℃DNA解链→冷却到55～60℃，引 物结合到互补DNA链→加热至70～75℃，热稳定 DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。 7.基因表达载体的构建 (1)目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且 可以