青岛农业大学-分子生物学实验考试.pdfVIP

实验一、大肠杆菌感受态细胞的制备与 质粒 DNA的转化 一、 实验目的 1、掌握大肠杆菌感受态细胞的制备方法 2、解转化的概念及其在分子生物学研究中的意义， 学习将外源质粒 DNA 转入受 体菌细胞并筛选转化体的方法。 二、 实验原理 1、 感受态细胞的概念 重组 DNA分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无 性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状， 这个导入过程及操作统称为 重组 DNA分子的转化。 在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在细胞间转化是否发生，一方面 取决于供体菌与受体菌两者在进化过程中的亲缘关系， 另一方面还与受体菌是否 处于一种感受状态有着很大的关系。 所谓的感受态，即指受体（或者宿主）最易接受外源 DNA片段并实现其转化 的一种生理状态， 它是由受体菌的遗传性状所决定的， 同时也受菌龄、 外界环境 因子的影响。 cAMP可以使