VITEK全自动微生物检测系统原理及其应用.pdfVIP

VITEK全自动微生物检测系统原理及其应用 近年来，微生物的检测鉴定技术已逐步由手工检测走向仪器化和电脑化，并力求简便、 快速、准确。由生物梅里埃公司出品的全自动微生物鉴定/药敏分析系统VITEK 是目前世界 上最先进、自动化程度最高的细菌鉴定仪器之一。 近年来，微生物的检测鉴定技术已逐步由手工检测走向仪器化和电脑化，并力求简便、 快速、准确。由生物梅里埃公司出品的全自动微生物鉴定/药敏分析系统VITEK 是目前世界 上最先进、自动化程度最高的细菌鉴定仪器之一。VITEK 已被许多国家定为细菌最终鉴定 设备，并获美国药品食品管理局（FDA）认可。该系统有高度的特异性、敏感性和重复性， 还具有操作简便、检测速度快的特点，绝大多数细菌的鉴定在2～18 h 内可得出结果。现将 该系统的工作原理、主要结构、功能并结合我们使用后的一些体会介绍如下。 1 工作原理 VITEK 对细菌的鉴定是以每种细菌的微量生化反应为基础，不同种类的VITEK 试卡（检 测卡）含有多种的生化反应孔，可达30 种。将手工分离的待检菌的纯菌落制成符合一定浊 度要求的菌悬液，经充填机将菌悬液注入试卡内，封口后放入读数器/恒温培养箱，根据试 卡各生化反应孔中的生长变化情况，由读数器按光学扫描原理，定时测定各生化介质中指示 剂的显色(或浊度反应，然后把读出信息输入电脑储存并进行分析，再和预定的阈值进行比 较，判定反应，再通过数值编码技术与数据库中反应文件进行比较，最后鉴定报告将在显示 器上自动显示)并在打印机上自动打印。 2 VITEK 系统的结构组成 2.1 检测卡 目前VITEK 系统的检测卡有 14 种，微生物常用的有 7 种，即：革兰氏阳性菌鉴定卡 （GPI ）、革兰氏阴性菌卡（GNI+ ）、非发酵菌卡（NFC ）、酵母菌卡（YBC）、厌氧菌卡（ANI）、 芽胞杆菌卡（BAC）、奈瑟氏菌嗜血杆菌卡（NHI ），以及药敏检测卡等。每张检测卡对应接 种 1 份标本，检测卡为一次性消耗品。 2.2 充填机 将待测菌的菌悬液注入试卡内。 2.3 读数器/恒温箱 可在培养过程中定时读出细菌在试卡内培养基中的生长变化值。 2.4 电脑主机/显示器/键盘/打印机 用于储存和分析资料、系统的操作和结果分析鉴定， 实验结果的自动显示报告和打印。 2.5 电源稳压器和UPS 在外围断电的情况下提供电脑主机约 10 min 持续电源。 3 VITEK 系统的功能 3.1 可鉴定405 种细菌 其中：GPI 卡可鉴定凝固酶阳性和阴性的葡萄球菌、肠球菌、草绿色和β溶血链球菌、 棒状杆菌属以及李斯特氏菌属和丹毒丝菌等51 种；GNI+卡可鉴定肠杆菌科、弧菌科和非发 酵菌等 116 种；NFC 卡可鉴定不动杆菌、气单胞菌、产碱杆菌、假单胞菌、弧菌等42 种； YBC 卡可鉴定假丝酵母（念珠菌）、隐球菌、地霉、丝孢酵母、红酵母等34 种；ANI 卡可 鉴定放线菌、拟杆菌、梭杆菌、乳杆菌、真杆菌、梭菌、消化链球菌等94 种；BAC 卡可鉴 定芽胞杆菌21 种；NHI 卡可鉴定奈瑟氏菌、嗜血杆菌、金氏菌、摩拉氏菌、布兰汉氏菌等 47 种。 3.2 可对澄清液体中的微生物进行计数。 3.3 检测细菌生长曲线。 3.4 药敏试验 有70 多种药物约50 多种药物组合的药敏卡。 4 实际应用讨论 实验室自引进VITEK 系统后，用已知的金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、李斯特氏菌、 O157 ∶H7、沙门氏菌、志贺氏菌、绿脓杆菌、副溶血弧菌共8 株标准菌株进行检测，结果 与已知的完全相符。而且鉴定沙门氏菌属只需4 h ，志贺氏菌属6 h，缩短了肠道致病菌生化 鉴定的时间，操作也简便。 如 1999 年7 月13 日晚某市一大厦中心餐厅发生食物中毒，发病49 人。将可疑菌株用 VITEK 仪器进行鉴定，仅用 13 h 就得出鉴定结果,而常规鉴定则需24 h 。 又如1999 年6 月从一胖听的进口烤鳗酱油中分离出可疑酵母菌株，VITEK 系统的YBC 卡鉴定为丛生丝孢酵母。而常规法鉴定酵母菌需配制各种培养基，一般实验室试剂多不齐全， 且鉴定者要有相当的工作经验。 然而在未知菌的鉴定中，VITEK 系统有时会因种种因素不能顺利获得鉴定报告，或由 一些特殊的报告信息代替了正常的鉴定结果。最常见的有“unidentified organism ”（不能鉴 定的细菌）。产生这