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1;一、实验目的
1.了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点;
2.区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征;
3.掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术。;二、实验材料、用具及试剂
果蝇:野生型,白眼黑身,白眼小翅,红眼残翅,黑檀体。
双目解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白瓷板、新毛笔、乙醚、酒精
;三、实验内容
1.果蝇的生活史
果蝇(Drosophila melanogaster 2n=8) 中文名:黑腹果蝇
果蝇属于节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属,与家蝇是不同的种。;; 果蝇的生活周期长短与温度关系很密切。30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡,低温则使它的生活周期延长,同时生活力也降低,果蝇培养的最适温度为20-25℃。
;生活史:
完全变态:
最适温度:20-25℃
生活史周期:
12-15 day (20-25℃)
10 day (26℃)
57 day (10℃)
羽化后:
8-12h 交配
两天后产卵
成虫存活:15 day (25℃);卵:羽化后的雌蝇一般在12小时后开始交配,两天后才能产卵。卵长,为椭圆形,腹面稍扁平,被绒毛膜,在背面的前端伸出一对触丝(filament) ,它能使卵附着在食物(或瓶壁)上,不致深陷到食物中去。 ;三龄幼虫,在培养基上作沟穿孔。;蛹:幼虫生活7-8天准备化蛹,化蛹前从培养基上爬出,附着在瓶壁上,逐渐形成一梭形的蛹。在蛹前部有两个呼吸孔,后部有尾芽,起初蛹壳颜色淡黄而柔软,以后逐渐硬化,变为深褐色,表明即将羽化了。
成虫:幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化,最后从蛹壳前端爬出。刚从蛹壳里羽化出来的果蝇虫体比较长,翅膀尚未展开,体表尚未完全几丁质化,故呈半透明的乳白色。透过腹部体壁,可以看到黑色的消化系统。不久,变为短粗圆形,双翅展开,体色加深。如野生型初为浅灰色,然后呈灰褐色。;果蝇的寄生虫——螨虫;2.形态构造
头部:有一对复眼,三个单眼和一对触角。
胸部:有三对足,一对翅和一对平衡棒。
腹部:背面有黑色环纹,腹面有腹片,外生殖器在腹部末端,全身有许多体毛和刚毛。; 3.成虫雌雄的鉴别;4.果蝇常见的几种突变类型;5.果蝇的性???决定
1)染色体组成 果蝇为二倍体2n=8,
核内有丝分裂:不涉及细胞分裂和核分裂的染色体分裂方式。
体联会:一些特殊的体细胞中(如果蝇唾腺细胞)的染色体经多次复制却不分开,依旧紧密地排列在一起就象减数分裂中的联会现象一样。
染色体组:来自二倍体生物的正常配子的所有染色体。
连锁群:来自配子中的每条染色体及其携带的基因。; 2)果蝇的性别决定
果蝇的性别决定为XY型,Y染色体在性别决定上不起作用,只与育性有关。含有Y染色体,可产生正常的配子,不含Y染色体,则配子不育。性别决定与性比值(性指数)有关。
X/A=1 则为雌性;X/A=0.5 则为雄性。
X/A>1,为超雌;X/A<,则为超雄;<X/A<1则为中间性。
雌雄基因平衡理论:果蝇X染色体上有很多雌性基因,常染色体上有很多雄性基因,Y染色体上很少或没有与性别决定有关的基因,因此性别决定于基因的平衡。; 3)果蝇的连锁群
X染色体上有141个基因;第2染色体上有228个基因;第3染色体上有156个基因;第4染色体上有12个基因。
4) 同源染色体:来源相同、结构相似、控制的性状相同,在减数分裂中配对的一对染色体。;四、实验步骤
1.果蝇的饲养
1)培养基的配制
果蝇以酵母菌为食,常采用发酵的培养基繁殖酵母菌来饲养果蝇。培养基常用玉米粉、米粉或香蕉配制,本实验采用玉米培养基,其配方如下:;果蝇培养基成份(100ml);配制方法;注:分装前将饲养瓶、棉塞、吸水纸及其它用具和器皿高压蒸气灭菌(15磅,15min)。分装时若瓶口较小,用大漏斗将饲料倒入,勿使饲料粘附瓶壁。若无干酵母粉,可于饲料分装后滴几滴酵母液于饲料表面。待饲料冷却后,用酒精棉球或吸水纸将瓶壁上的水汽擦净,塞上棉塞。 ;培养瓶的灭菌;配制好的培养基;2)果蝇继代培养;幼虫化蛹时爬到瓶璧或滤纸上。;2 果蝇性状的观察
1)果蝇的麻醉处理
在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等操作中,应先将果蝇麻醉,使其保持安静状态。麻醉方法如下:
(1)准备一只与培养瓶口径相同的空瓶作为麻醉瓶,并配以脱脂棉塞。
(2)去掉培养瓶棉塞,立即与麻醉瓶口相对,培养瓶在上,一手稳住两瓶,另一手轻轻震拍培养瓶,使果蝇落入麻醉瓶中。;(3)滴数滴乙醚于麻醉
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