艾滋病实验室检查PPT课件.ppt

* 诊断标准 急性期 ★流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳性 ★仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性 无症状期 ★流行病学史、HIV抗体阳性 ★仅实验室检查HIV抗体阳性 * 诊断标准 艾滋病期 ★ 流行病学史，HIV抗体阳性，临床表现有下列一项或以上： 1.短期（6个月内）体重下降10％以上；2.咳嗽或腹泻超过4周；3.持续或间歇发热超过4周；4.全身淋巴结肿大；5.反复带状疱疹或慢性播散性HSV感染；6.口咽念珠菌病；7.全身搔痒性皮炎；8.反复发生的败血症；9.深部真菌感染，马尔尼非青霉菌；10.肺孢子虫肺炎；11.活动性巨细胞病毒感染；12.弓形虫脑病。13.反复发生、难治性肺部感染或进展迅速的活动性结核病；14.中枢神经系统受损、占位性病变或中、青年痴呆症；15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。 Ⅰ Ⅰ 可编辑 可编辑 * 艾滋病 (AIDS) * 实 验 室 检 查 * 免疫学检测 AIDS患者 正常(×109/L) CD4 0.2 1(0.8～1.2) CD4/CD8 1 1.2～2.1 淋巴细胞总数 1 2～3 流式细胞仪测定 * 血清学检测（１） HIV抗体的初筛试验——ELISA（酶联免疫试验） * 血清学检测（２） HIV抗体的确证试验——Western blot （免疫印迹试验） * 血清学检测（３） HIV抗原检测——ELISA夹心法 测定p24抗原 敏感性很高（7～10 pg/ml） 特异性稍差（可有假阳性） * 分子生物学检测（1） HIV RNA检测—RT-PCR（逆转录-聚合酶链反应） PCR：高温变性(94℃)→低温退火(55℃)→适温延伸(72℃)；经25~30个循环，成倍数扩增 荧光定量PCR：比常规PCR多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子） 应用：PCR查PBMCs前病毒DNA；RT-PCR查血浆中的病毒RNA * 分子生物学检测（2） 淋巴细胞HIV RNA检测—— Northern印迹杂交(Northern blot) 原理： RNA片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂交 * 分子生物学检测（3） HIV变异株检测——Sanger测序法 原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某一特定的碱基处终止，产生A、T、C、G四组不同长度的一系列核苷酸，通过在尿素变性的PAGE胶上电泳，获得DNA序列 * 病毒检测 血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIV 操作复杂，主要用于科研 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * 诊 断 * 诊断原则 流行病学史：有静脉注射毒品史；多个性伴和不洁性生活史；输入未经HIV抗体检测的血液和血制品史；HIV抗体阳性所生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。 临床表现： 高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现， 颈、腋及枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性HIV感染。 无症状期、艾滋病期临床表现。 实验室检查：①HIV抗体阳性，并经确证试验确认。②CD4+T淋巴细胞数明显减少。③HIV RNA和P24抗原的检测有助于早期诊断新生儿的HIV感染。 可编辑 可编辑