微型电化学传感器的研究及其在细胞分析中的应用.pdf

微型电化学传感器的研究及其在细胞分析中的应用 【摘要】：细胞是组成生物机体的基本结构和功能的单位。初期的细 胞学是以研究细胞的形态和结构为主要内容。 最近几十年， 随着现代 科学技术， 特别是由于分子生物学的发展， 使细胞学的研究内容焕然 一新，对于细胞的研究已逐渐发展成为一门研究细胞显微结构和超微 结构化学组成的科学；生命活动的一些基本过程如物质代谢、运动、 发育、繁殖以及遗传等重要机制， 正在细胞水平上进行日益深入地研 究。同时，现代细胞化学技术又吸引了多学科的先进技术，更深入地 阐明了细胞的增殖与分化、 遗传与变异， 为疾病的病理和病因提供科 学依据。目前， 细胞学已逐渐发展成为从显微水平、亚显微水平和分 子水平三个层次上深入探讨细胞生命活动的学科。 细胞的分析研究已 经成为分析化学前沿学科领域中的热门话题， 研究细胞化学不仅有利 于确定细胞功能和代谢及细胞内的化学成分， 而且还有利于确定细胞 特征，进行疾病的病理和有关药理的机制研究。目前，细胞生物学、 分子生物学等生命科学前沿学科向分析化学提出的课题集中在多肽、 蛋白质、核酸等生物大分子分析以及生物药物分析和超痕量、 超微量 生物活性物质， 如单个细胞内生物物质的分析。 在生物无机分析领域 中，痕量元素分析已集中到元素在生物组织层、 单个细胞甚至细胞膜 中的微分布及其结合形式等方面。 使用超微量样品的微痕量分析， 检 测限达到 fg 级水平。生物现象最基本的过程是电荷运动，人体运动、 大脑信息传递及细胞膜的结构与功能机制都涉及到电化学过程， 可以 说，电化学是生命科学的基础学科。 热点研究领域之一 —— 生物电分 析化学便是建立在电分析化学、生物物理学、生物化学、电生物物理 学、电生理以及电化学等数门学科基础上的独立学科。 在电化微型电 化学传感器的研究及其在细胞分析中的应用一论文摘要学的基本原 理和实验方法基础之上， 生物电分析化学已经迅速发展成为研究和探 讨生命现象本质的最合适、 最有力的工具之一。 本论文创新性地以多 种灵敏度高、 选择性好的微型电化学修饰传感器， 对细胞损伤和修复 过程中胞内外的多种生命活性物质的水平变化进行了研究。 以心肌细 胞、内皮细胞、平滑肌细胞等心血管细胞为研究对象，以酶、纳米材 料等为修饰剂，研制了多种用于监测细胞内外 NO、次黄嘿吟、细胞 色素 C 及超氧阴离子自由基的微型传感器，对细胞损伤及给药修复 后的信息物质的水平变化进行了深入研究， 建立了细胞实时在线监测 的新方法。因此， 本论文不仅拓展了电分析化学的研究领域，对促进 细胞生物学和临床科学的发展具有比较重要的理论意义和科学价值， 同时在开发治疗心脏病等心血管疾病药物方面也具有广泛的应用前 景。第一章 :序言本章对研究细胞的传统生物技术方法、分析化学在 细胞研究中的应用以及生物体中信息物质及检测技术研究进展等方 面进行了比较详尽的综述， 着重综述了毛细管电泳 (CE)分析法、 微柱 分离法、微电极电化学法在细胞分析中的应用， 同时对细胞中重要的 信息分子，包括 :一氧化氮、超氧阴离子、嗓吟碱以及细胞色素