果蔬呼吸强度的测定.docVIP

实验三果蔬呼吸强度的测定 ?一、实验目的 测定呼吸强度，了解果蔬采后生理动态，为低温和气 调贮运及呼吸热的计算提供依据。 ?二、实验原理 有氧呼吸是呼吸的主要方式 ? C6H12O6+6O2 f 6CO2+H2O 常用单位：CO2 mg(mL)/hr.kg； O2 mg(mL)/hr.kg 采用一定量的“oil溶液，吸收果蔬在一定时间内呼吸 释放的CO产生 ，用饱和BaC】2沉淀 以避免Na2CO3干扰滴定结果，然后用标瘵草酸溶液滴 定剩余的NaOII,从空白滴定与样品滴定所消耗的草 酸体积差，即可计算出其呼吸强度。 2NaOH+CO2—Na2CO3+H2O Na2CO3+BaCl2—BaCO, ! +2NaCl 2NaOH+H2C2O4-*Na2C2O4+2H2O 三、材料及用具 试验材料：苹果、番茄、菠菜、马铃薯等。 药品：钠石灰、20% NaOH、0.4N NaOH、0.200N H2C2O4＞饱和BaC】2溶液、酚酥指示剂、正丁醇等。 仪器：大气釆样器、真空干燥器、培养皿、吸收管、 50mL酸式滴定管、滴定台、三角瓶、漏斗、25mL移液 管、lOmL移液管、5mL移液管、吸耳球、天平等。 ?（一）气流法 ?气流法的特点是果蔬处在气流畅通的环境中进行呼吸，比 较接近自然状态。因此，可以在恒定的条件下进行较长时 间的多次连续测定。测定时，经钠石灰和NaOH过滤的不 含CO?的气流通过果蔬的呼吸室，将果蔬呼吸释放的CO? 带入畋收管，被吸收管中定量的NaOH所吸收，经一定时 间的吸收后，取出NaOH,用草酸滴定剩余的NaOH,从空 白滴定与样品滴定所消耗的草酸体积差，可求得果蔬样品 的呼吸强度。 1.连接：把各部分按图1所示串联起来（暂不串联吸收 管），检査是否漏气。其方法是：开启大气采样器，如 果在装有20% NaOH溶液的净化瓶中有连续不断的气流 产生，说明整个系统气密性良好。 椚石灰 20?NaOH 呼吸至 ? 2?空白滴定：用移液管吸取0?4N NaOH溶液 10mL,放入吸收瓶中，加一滴正丁醇，按图 将吸收管接在呼吸室和安全瓶之间（呼吸室不 放试样），呼吸室与安全瓶连接。拨动大气采 样器开关，将气流量调在0?4升/分，将定时针 旋扭转到30分钟处，使呼吸室抽空平衡30分钟。 ? 当呼吸室抽空半小时后，把定时针重拨到30分钟处, 调整流量，保持0?4升/分，当测定时间到后，取下吸收 管，将碱液移入三角瓶中（用重蒸憎水将吸收管冲洗 4?5次），加5mL饱和BaC.溶液和酚猷指示剂2滴， 然后用0.200N草酸滴定至粉丘色消失即为终点，记下 滴定值，重复2次，取平均值，为空白滴定量（匕）。 4.试样测定：称取果蔬试样1公斤，放入呼吸室中，记录测 定温度，先将呼吸室与安全瓶连接，拨动大气釆样器开关, 将气流量调在0.4升/分，将定时针旋扭转到30分钟处，使 呼吸室抽空平衡30分钟。 用移液管吸取0?4N NaOH溶液lOmL,移入吸收瓶口，加一 滴正丁醇，当呼吸室抽空半小时后，立即接上吸收管，把 定时针重拨到30分钟处，调整流量，保持0?4升/分。待测样 品测定时间到后，取下吸收管，将碱液移入三角瓶中（用 重蒸馆水将吸收管冲洗4?5次），加5mL饱和Bad?,溶液 和酚猷指示剂2滴，然后用0.200N草酸滴定至粉红色消失即 为终点，记下滴定值（V?）。 5.结果计算： 呼吸强度（CC^mg/kg-hr） =（V1~V2）NX22 / （W-h） N： H2C2O4的曹量浓度（N） W：岳律重量（kg） h：测定时间（小时） 22： CO?的毫克当量 酚駄指示剂2滴，用0.200N 酚駄指示剂2滴，用0.200N标准草 滴定剩余的NaOH, （二）静置法 方法简单,不需特殊设备， 测定时将样品置于真空干燥 器中，干燥器底部放入一定 量的碱液，果蔬呼吸释放的 co2,自然下沉而被碱液吸 收，静置一定的时间后，取 出碱液，用草酸滴定，求出 样品的呼吸强度。 ?称取试样1公斤，置于塑料网袋中，记录测定温度。用移 液管吸取0.4N NilOH溶液25mL,置于真空干燥器内的培 养皿中，立即将装好样品的网袋置于干燥器内铅丝隔板 上，（空白试验置空网袋于干燥器内）盖严，记时，打 开U型管活塞，测定2小时后取出样品培养皿，立即将培 养皿中的NaOH用漏斗小心地移入250mL三角瓶中，（用 重蒸憎水冲洗培养皿3?4次），加饱和BaCl2溶液5mL, 记下滴定值（V2）o ?仪器打开预热两个小时。 ?测定空罐的数据，打开气流泵，计时二十 分钟,记录 分钟, 记录CO2的读数。 ?将待测定的样品称重，然后放入测定罐中, 拧紧旋盖，打开气流泵(400mL/rniri) 开始测量。二十分钟后记录数据。所得 CO2的读数减去空罐CO2的读数。 F x