免疫荧光细胞化学技术.pptVIP

七、非特异性染色的产生及消除方法产生的原因： （1）部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。 （2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。 （3）组织中还可能存在类属抗原与相应抗体结合。 （4）制备的免疫血清中混杂抗其他组织成分的抗体。 （5）抗体分子上标记的荧光素分子太多，过量标记的抗体分子带过多的阴离子，可吸附于正常组织上而呈现非特异性染色。 （6）荧光素不纯，标本固定不当等。  第三十一页，共43页 免疫荧光细胞化学技术 第一页，共43页 免疫荧光细胞化学技术 (immunofluorescence cytochemistry) 采用荧光素标记的已知抗体或抗原作为探针，检测待测细胞或组织内的靶抗原或抗体，形成带有荧光素的抗原抗体复合物。利用荧光显微镜观察标本，根据组织细胞中荧光物质的存在，确定抗原或抗体的性质并定位，以及利用定量技术测定含量。 第二页，共43页 荧光抗体法： 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法。 较常用 荧光抗原法： 用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法。 荧光抗体法+荧光抗原法=免疫荧光细胞（组织）技术 免疫荧光细胞化学技术 包括荧光抗体法和荧光抗原法 第三页，共43页 免疫荧光细胞化学方法： 直接法、间接法、补体法 免疫荧光染色标本制