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实验二 实验二 分光光度法测定未知溶液的浓度 (Determine the Concentration of Unknown Solution by Spectrophotometry) 实验目的 1. 掌握721E分光光度计的原理、结构与操作 方法。 2. 掌握用分光光度技术对未知溶液进行定量 分析的方法。 3. 制作CuSO4标准曲线，并用以求得待测 CuSO4溶液的浓度。 主要内容 • 分光光度法的原理 • 吸光度的测量 • 定量分析方法 • 721E分光光度计的操作方法 • 未知CuSO4溶液浓度的测定 分光光度法 • 问题：如何测定溶液中某一种物质的浓度？ • 提示(酸碱滴定、氧化还原、络合滴定、沉淀等) • 光分析：经历了目视比色、光电比色和分光光度法 几个不同阶段。 • 分光光度法：利用溶液对单色光的吸收度来确定溶 液中有色物质的含量 – 有色物质溶液颜色的深浅与其浓度有关，浓度愈大，颜 色愈深 光的基本性质 • 光是一种电磁波，具有波动性和微粒性。 • 电磁波谱图 图1－1 电磁波谱 • 可见光区：波长范围约为380~760nm • 近紫外光：280~380nm • 溶液的颜色 物质的颜色 吸收光颜色 吸收光波长 范围(nm) – 当白光通过某一溶 黄绿 紫 380~435 液时，该溶液会选 黄 蓝 435~480 择性地吸收某些波 橙红 绿蓝 480~500 长光而让那些未被 红紫 绿 500~560 吸收的光透射过 紫 黄绿 560~580 去，溶液呈现透射 蓝 黄 580~595 光的颜色。 绿蓝 橙 595~650 – 被吸收的光与透射 蓝绿 红 650~760 过去的光称为互补 色光 • 吸收曲线 – 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，即可得到一条吸 光度随波长变化的曲线，称之为吸收曲线或吸收光谱。 – 光吸收程度最大处的波长，称为最大吸收波长 ，常用 λ 表示。 max – 在正常情况下，选用不同浓度的某种溶液，最大吸收波长 是固定不变的。 A 应用： • 可作为物质定性、定量 分析的依据