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- 2021-11-22 发布于福建
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第一节 研究蛋白质构像的方法
一、X 射线衍射法
基本规律 :X 射线穿过原子平面层时, 当光程差等于波长的倍数, 反射波可以互相叠加
形成衍射斑点。如上图所示,光程差等于 2dsin θ,上述规律可总结为 Bragg 方程: 2dsin θ
=n λ(n= ±1,±2 ,± 3 …)。
二、研究溶液中蛋白质构像的光谱学方法
(一)紫外差光谱
芳香族氨基酸在极性环境下吸收峰向短波长移动,称作 篮移 ,反之会 红移 。
(二)荧光和荧光偏振
变性和非变性蛋白质荧光峰和荧光偏振的位置会有特定的变化。
(三)圆二色性
圆偏振光可看成是相位相差 90 °的两个平面偏振光叠加而成,若左、右圆偏振光因被
测物的吸收而振幅不同,二者叠加会形成椭圆偏振光。
椭圆率 θ=短轴 /长轴
=tan θ
≈33cl? ε(适合于小的 θ,? ε=εR- εL ,c 为摩尔浓度, l 为光程, ε为摩尔吸
光系数 )
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