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止血海绵中微量甲醛酚试剂分光光度法测定 止血海绵中微量甲醛酚试剂分光光度法测定 【关键词】 止血海绵 止血海绵是药用明胶经发泡与甲醛交联制成的一种医疗产品。甲醛不仅对止血海绵植入部位的组织有刺激作用，而且还被认为是一种可疑致癌物。因此，准确测定止血海绵中微量残留甲醛的含量是控制该类产品生产和质量的关键〔1〕。目前，甲醛的测定方法有容量法、酚试剂法、乙酰丙酮光度法、变色酸光度法、气相色谱法和动力学光度法等，其各有优缺点〔2，3〕。本文对酚试剂法测定止血海绵中的微量残留甲醛的含量进行了探讨，获得满意结果，报告如下。 1 材料与方法 11 主要仪器与试剂 (1)酚试剂显色液: 称量005g酚试剂,3-甲基-苯并噻唑胺C6H4SN(CH3)C: NNH2.HCl，简称MBTH,，加水溶解，稀释至500ml。放冰箱保存，可稳定3d。 (2)1%硫酸铁铵溶液: 称量10g硫酸铁铵，用01mol/L盐酸溶液溶解，并稀释至100ml。 (3)甲醛标准储备溶液: 量取28ml含量为36%,38%甲醛溶液放入1000ml容量瓶中，用蒸馏水稀释到刻 ml约含1mg甲醛。用碘量法标定其准确浓度。此溶液可稳定3个度。此溶液1 月。 (4)甲醛标准工作液: 临用时，将甲醛标准储备液用水稀释成100ml含0001mg甲醛的标准工作液。 (5)仪器: 752型分光光度计(上海第三分析仪器厂)。(6)材料: 止血海绵(江苏南通某工厂)。 12 测定方法 121 标准曲线绘制 用标准溶液绘制标准曲线: 取10ml具塞比色管，分别加入系列甲醛标准溶液和4ml酚试剂显色液及05ml 1%硫酸铁铵溶液，以水稀释至刻度摇匀，于35?水浴中放置15min,在630nm波长下，以水作参比，测定各管的吸光度，以甲醛含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 122 样品溶液制备及测定 准确称取一定量的止血海绵，按照国家标准GB/T 16886.12-2017加入规定量的生理盐水，于(37?1)?下浸提一定时间〔4〕。准确吸取1ml样品溶液于10ml比色管中，按制作标准曲线的操作标准曲线的操作步骤测定吸光度。 2 结果与分析 21 实验条件的选择 211 测定温度的选择 分别取09812μg/ml的甲醛工作液1ml，加入4ml酚试剂显色液及05ml的1%硫酸铁铵溶液，混匀，分别放置。5，10，20，25，35，40?进行15min显色反应，在630nm波长下，测定其吸光度。实验结果表明，温度对甲醛与酚试剂的显色反应影响很大。温度低时，吸光度较小，而当温度达到25?时，吸光度趋于稳定。这主要是因为甲醛与酚试剂的显 色反应在低温时反应不完全所致。因此，将甲醛与酚试剂的显色反应温度控制在35?水浴中进行。 212 酚试剂用量的选择 分别取09812μg/ml的甲醛工作液1ml，加入不同体积的酚试剂显色液及05ml 1%硫酸铁铵溶液，用水稀释到相同体积后摇匀，测定其吸光度。结果可见，当酚试剂用量在30,60ml时，吸光度达到最大，并且比较稳定。因此，将酚试剂的用量定为40ml。 213 硫酸铁铵溶液用量的选择 按实验方法固定甲醛工作液的体积(1ml)和酚试剂的用量(40ml)，改变硫酸铁铵溶液的体积，测定不同条件下的吸光度。结果表明，当硫酸铁铵溶液体积为04,09ml时，吸光度达到最大，并基本保持稳定，因此，硫酸铁铵溶液的用量定为05ml。 214 止血海绵浸提时间的确定 国家标准中关于医疗制品的浸提时间推荐了1，12，24，48，72h。为了确定止血海绵的最佳浸提时间，分别于浸提不同时间后，测定浸提液中的甲醛浓度。结果表明，浸提液中甲醛的浓度的随时间先上升又降低。这主要是止血海绵中的甲醛浸提出来需要一定的时间，但同时浸提出来的甲醛又被氧化。因此，将浸提时间定为24h。 22 标准曲线的线性范围及检出限 按实验方法测定一系列不同体积甲醛溶液体系的吸光度。当甲醛含量在002,15μg/5ml时，有良好的线性关系。因此，甲醛的检出限为0004μg/ml。 23 回收率测定 称取一定量的止血海绵按上述样品测定方法测定样品中甲醛的含量。在同样的样品溶液中准确加入一定量的甲醛标准溶液，按相同的分析步骤测定其中加入甲醛的含量，并计算回收率，分别进行5次平行测定。回收率分别为 1040%，1010%，1028%，952%。 966%， 24 止血海绵样品中甲醛含量的测定 分别取不同批次的止血海绵按上述测定方法测定样品溶液中甲醛的含量，计算止血海绵中的甲醛含量，每个样品平行测定5次，并计算相对标准偏差(RSD)，3个样品的相对标准偏差为37%，29%，23%。 3 小结 酚试剂分光光度法测定甲醛浓度线性范围