BCA蛋白浓度测定(整理版).docVIP

仅供个人参考 BCA蛋白浓度测定 Pierce? BCA Protein Assay Kit （试剂盒室温保存） 1. 准备BSA标准品 按Table 1配制一系列的蛋白标准品. 原液（stock）:取出一个ample（内含2mg/mL的白蛋白标准品（此量足够3个 replicati on） 2. 准备 BCA工作液（Working Reagent,WR） （1）用公式计算总工作液量 （标准品数+待测样品数）*（复制数）*（每个工作液的量）=总的需要的工作液 的量 例子:3个待测样品，每个样品2个复制所需的工作液量 （9个标准品+3个待测样品）*（2个复制数）*（2ml）=48ml工作液 Note:试管法：每个试管需 2ml工作液 微孔板：每个孔需200ul工作液（例子中需共4.8ml） （2）BCA试剂A:B=50:1配制适量BCAX作液，充分混匀。 对于上面的例子,试管法需要50ml BCA A液+1ml BCA B液，微孔板法需5ml A液 和1mlB液. B液加到A液中时,迅速浑浊，但是通过混匀立即变成清澈 绿色的工作液.工作液 在密闭室温下可以保存数天. 3. 微孔板步骤（样品与工作液比例=1:8） （1） .标准液和样品各25ul加入微孔板中 Note:若样品有限，可各加10ul（样品与工作液比例=1:20） （2） .每孔加200ul的工作液并且充分震荡30s。 （3